谷胱甘肽轉移酶的分離純化、熒光光譜以及外源物質(zhì)對其活性影響研究.pdf

1、谷胱甘肽轉移酶(GST)是生物體中廣泛存在的蛋白酶，其功能是催化谷胱甘肽(GSH)親核性的巰基與親電性底物結合，從而降低親電性物質(zhì)對生物機體的傷害。從二十世紀七十年代發(fā)現(xiàn)谷胱甘肽轉移酶至今，對它的研究不斷深入，其在生物體中的功能也不斷被揭示，本文主要研究了谷胱甘肽轉移酶的光譜學性質(zhì)、分析方法以及外化學物質(zhì)對昆蟲的谷胱甘肽轉移酶的影響。全文共分五章，主要內(nèi)容如下：第一章系統(tǒng)綜述了谷胱甘肽轉移酶研究進展，包括谷胱甘肽轉移酶的分類、解毒機理、

2、結構、純化、與昆蟲抗藥性的關系。 第二章通過親核層析純化分離了谷胱甘肽轉移酶，分離后得到電泳純產(chǎn)品，考察了谷胱甘肽轉移酶的熒光光譜學性質(zhì)以及不同酸堿條件下熒光變化；通過熒光性氨基酸熒光移動，揭示了其所處的微環(huán)境；初步研究了在不同物理處理條件酶活性的變化。 第三章研究了谷胱甘肽轉移酶活性測定方法，傳統(tǒng)方法是測定催化產(chǎn)物的吸光度，利用吸光度的變化來定義酶活性。本文嘗試用電化學方法，機理與光度法相似，但是以氯離子濃度變化來

3、表示酶活性，氯離子濃度用氯離子選擇性電極進行測定。 第四章通過在食物中添加相關化學藥劑，研究了植物次生物質(zhì)煙堿、檸檬酸煙堿、蕓香苷對斜紋夜蛾體內(nèi)的谷胱甘肽轉移酶活性的影響，并測定了相關處理的斜紋夜蛾體內(nèi)谷胱甘肽轉移酶的普通熒光、同步熒光光譜，結果表明不同次生物質(zhì)對谷胱甘肽轉移酶的影響不一樣，有的具有誘導作用，有的具有抑制作用，在分子行為上表現(xiàn)為色氨酸殘基微環(huán)境極性變化。 第五章煙堿是煙草中含量較為豐富的次生代謝物，吸