睡眠剝奪致大鼠空間學習記憶障礙的LTP機制及谷維素多維B干預作用研究.pdf

1、睡眠障礙會影響人類的工作和生活。長期睡眠剝奪(sleepdeprivation，SD)可影響動物或人的發(fā)育，免疫功能，并可導致學習記憶能力受損。許多學者對于睡眠與學習記憶關系進行了深入的研究，并提供了大量的實驗證據(jù)，但是睡眠障礙導致學習記憶下降的確切機制至今未能完全闡明。 本研究針對睡眠障礙影響空間學習記憶功能機制及干預措施響進行了研究。主要采用神經(jīng)行為和電生理方法尤其是腦片膜片鉗技術研究了睡眠剝奪致大鼠空間學習記憶障礙的LT

2、P機制及谷維素多維B的干預作用。 第一部分：采用側腦室注射對氯苯丙胺酸(PCPA)及阿托品的方法制作大鼠睡眠障礙的模型，并連續(xù)同步采集腦電、肌電、眼電，以30s為一分段時間，按照時頻分析理論，以VisualBasic語言自編程序自動分析腦電，同時綜合分析肌電、眼電，按睡眠-覺醒周期分類方法對模型進行鑒定。結果如下：睡眠剝奪組每24h內睡眠總時間、NREM時間、REM時間短于對照組；而每24h內覺醒時間睡眠剝奪組長于對照組。說明

3、睡眠剝奪模型建立成功。 第二部分：采用Morris水迷宮檢測對照組和模型組大鼠的空間學習記憶能力；采用腦片膜片鉗全細胞記錄技術在單個細胞水平研究睡眠剝奪對大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞的長時程增強效應(LTP)的影響，同時采用細胞內標記技術對細胞形態(tài)進行確認。結果如下： 1.空間學習記憶的檢測：定位航行實驗中模型組大鼠找到原平臺的時間(潛伏期)長于對照組；空間探索實驗中模型組大鼠穿過原平臺的次數(shù)明顯少于對照組。說明模型組的

4、空間學習記憶成績比對照組差。 2.LTP的檢測：(1)使用低頻刺激為條件刺激，同時將細胞鉗制在-50mv，以此方法誘導由NMDA受體介導的LTP(能為APV阻斷)，結果顯示模型組很難誘導出由NMDA受體介導的LTP，而對照組易誘出；(2)采用低頻刺激為條件刺激，同時將細胞鉗制在-30mv，以此方法誘導由非NMDA受體介導的LTP(不能為APV阻斷)誘導由非NMDA受體介導的LTP時兩組未見明顯差別。提示睡眠剝奪對學習記憶的影響

5、的機制與抑制NMDA受體介導的LTP誘出有關。 第三部分：對大鼠睡眠剝奪模型給予腹腔注射谷維素和維生素B1,B2,B6,B12(治療組)進行干預，然后同樣對大鼠的睡眠進行定量，對空間學習記憶能力以及海馬CA1區(qū)錐體細胞的LTP進行檢測。結果如下： 1.睡眠檢測：治療組每24h內睡眠總時間、NREM時間、REM時間均明顯長于假治療組；治療組每24h內覺醒時間明顯短于假治療組。說明采用谷維素多維B能有效的促眠。

6、 2.空間學習記憶的檢測：定航實驗中治療組大鼠找到原平臺的時間(潛伏期)短于假治療組；空間探索實驗中治療組大鼠穿過原平臺的次數(shù)明顯多于假治療組。說明通過谷維素多維B改善睡眠可以提高空間學習記憶成績。 3.LTP的檢測：治療組易誘導出由NMDA受體介導的LTP，而假治療組則很難誘出；由非NMDA受體介導的LTP誘出率兩組也沒有明顯差別。提示通過谷維素多維B改善睡眠可以提高空間學習記憶成績其機理與提高NMDA受體介導的LTP的誘出