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文檔簡介
1、目的:通過觀察萆薢除痹湯對大鼠腎組織炎癥因子的調控作用,探討該方對尿酸性腎病的作用機制。
方法:本實驗分兩部分進行,第一部分為動物實驗部分(體內實驗),將實驗動物隨機分為6組(空白組,模型組,西藥組,中藥低劑量組,中藥中劑量組,中藥高劑量組),制備尿酸性腎病大鼠模型(腺嘌呤+乙胺丁醇),造模與給藥同時進行,觀察大鼠一般情況,處死后制作大鼠腎臟病理切片并觀察各組大鼠腎組織病理狀態(tài),檢測大鼠血尿酸、肌酐、尿素氮,運用免疫組織化學法
2、檢測各組大鼠NF-κB的蛋白生成狀態(tài),運用Western bolt方法檢測大鼠腎組織中各炎癥指標的蛋白表達,運用RT-PCR方法檢測大鼠腎組織中各指標的mRNA的表達。第二部分為細胞實驗部分(體外實驗),培養(yǎng)、傳代大鼠巨噬細胞NR8383細胞,以LPS溶液刺激各組細胞,制備不同濃度的萆薢除痹湯含藥血清。以Western bolt方法、RT-PCR方法檢測大鼠巨噬細胞中各指標的蛋白及mRNA表達,并觀察各組之間的區(qū)別。
結果:<
3、br> 1.動物實驗研究結果:腺嘌呤+乙胺丁醇的造模方法效果明顯,模型組的尿酸性腎病的病理狀態(tài)明顯。大鼠腎臟病理結果提示本方能有效減少尿酸鹽的沉積,明顯減輕炎癥細胞的浸潤和腎小管的擴張。與模型組相比,余各組大鼠血尿酸值、肌酐、尿素氮明顯降低(P<0.01);大鼠腎組織NF-κB蛋白的生成以及各指標的蛋白與基因表達均降低(P<0.05),并且中高劑量組對比更為明顯(P<0.01)。
2.細胞實驗結果:萆薢除痹湯能調控大鼠NR8
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