血管緊張素Ⅱ?qū)Χ喟桶纺芗毎蛲龅挠绊懠跋嚓P(guān)機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)對多巴胺能細胞凋亡的影響及相關(guān)機制。
　　方法：體外培養(yǎng)CATH.a多巴胺能細胞，使用AngⅡ或/和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）抑制劑及AngⅡ受體阻滯劑處理細胞24 h。采用噻唑藍比色分析(MTT)法檢測細胞活性;采用流式細胞儀和TUNEL試劑盒檢測細胞凋亡情況;采用熒光

2、定量PCR檢測NADPH氧化酶亞基gp91 phox、p67phox的表達;采用蛋白印跡技術(shù)檢測caspase-3剪切體及NADPH氧化酶亞基gp91phox、p67phox的水平;采用caspase-3活性檢測試劑盒、NADPH氧化酶活性檢測試劑盒分別檢測caspase-3及NADPH氧化酶的活性;采用流式細胞儀聯(lián)合相應(yīng)試劑盒檢測細胞內(nèi)活性氧(reactiveoxygen species，ROS)含量。
　　結(jié)果：同對照組相比，

3、AngⅡ(10nM-100nM)可顯著促進CATH.a細胞凋亡，其差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。同時，相較于對照組，AngⅡ(10nM-100nM)可增加CATH.a多巴胺能細胞內(nèi)的NADPH氧化酶活性及ROS含量，其差異具有顯著性(P＜0.05)。此外，上述AngⅡ的生物學效應(yīng)可被NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃麻素(apocynin)及血管緊張素Ⅱ-1型受體(angiotensinⅡ type1 receptor,AT1R)拮抗劑氯

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