黃芪多糖對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用.pdf

1、目的:
　　宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。細(xì)胞的失控性生長(zhǎng)是惡性腫瘤的重要生物學(xué)特征之一，手術(shù)和放化療的自身缺陷嚴(yán)重限制了宮頸癌患者的療效。因此，探索中藥等在宮頸癌治療中應(yīng)用的可行性具有重要的臨床意義。黃芪是常用的補(bǔ)氣中藥，黃芪多糖（astragalus polysaccharide，APS）是黃芪的主要活性成分之一。研究發(fā)現(xiàn)，APS可抑制白血病、胃癌、乳腺癌等惡性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。但尚未見(jiàn)APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的

2、抑制作用及機(jī)制的報(bào)道。本研究旨在探討APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用及相關(guān)機(jī)制，為APS在宮頸癌治療中的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　1.提取APS并定量。
　　2.通過(guò)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線觀察APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和倍增時(shí)間的影響。
　　3.通過(guò)平板克隆形成實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)觀察APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞的克隆形成能力和細(xì)胞周期分布的影響。
　　4.通過(guò)Western blottin

3、g方法觀察APS處理前后宮頸癌Hela細(xì)胞中細(xì)胞周期蛋白A(cyclin A)、cyclin B、cyclin E和p21等細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)基因表達(dá)的變化。
　　結(jié)果:
　　1.制備的APS水溶液的濃度為53.623mg/mL。
　　2.細(xì)胞生長(zhǎng)曲線結(jié)果顯示:100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的APS處理的宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)速度均明顯慢于未用APS處理的宮頸癌Hela細(xì)胞(P＜0.01)，不同濃度AP

4、S處理的宮頸癌Hela細(xì)胞的倍增時(shí)間顯著長(zhǎng)于未用APS處理的宮頸癌Hela細(xì)胞（P＜0.01）。
　　綜合考慮100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)均具有抑制作用和細(xì)胞狀態(tài)的變化，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組為200μg/mL的APS誘導(dǎo)48h的宮頸癌Hela細(xì)胞，對(duì)照組為不加藥的宮頸癌Hela細(xì)胞。
　　3.平板克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組宮頸癌Hela細(xì)胞的克隆形成均數(shù)顯著低于對(duì)照組

5、宮頸癌Hela細(xì)胞(P＜0.01)，且克隆體積較小。
　　4.流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:與對(duì)照組宮頸癌Hela細(xì)胞相比，實(shí)驗(yàn)組宮頸癌Hela細(xì)胞的細(xì)胞周期出現(xiàn)G1期阻滯(P＜0.01)，同時(shí)，S期(P＜0.01)和G2/M期(P＜0.05)細(xì)胞減少。
　　5.Western blotting結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組宮頸癌Hela細(xì)胞中cyclin B和cyclin E的表達(dá)顯著低于對(duì)照組宮頸癌Hela細(xì)胞(P＜0.01)，p21的表達(dá)顯著