神經(jīng)節(jié)苷脂GM3通過Arhgdib和TNFα調(diào)節(jié)細胞的表現(xiàn)型.pdf

1、神經(jīng)節(jié)苷脂是脊椎動物細胞膜的主要組成成分,由神經(jīng)鞘氨醇和脂肪酸組成的神經(jīng)酰胺組成了神經(jīng)節(jié)苷脂的疏水殘基。神經(jīng)節(jié)苷脂已經(jīng)被確認(rèn)為腫瘤抗原、微生物及其產(chǎn)生毒素的受體,并且參與了細胞生長、分化。神經(jīng)節(jié)苷脂通過調(diào)節(jié)細胞與細胞之間的相互作用來進一步調(diào)節(jié)腫瘤細胞的侵蝕與轉(zhuǎn)移。最近,發(fā)現(xiàn)GM3參與小鼠黑色素瘤B16細胞形態(tài)、細胞運動性、生長和轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié)。在半乳糖轉(zhuǎn)移酶-6(B4Gal-T6)順反cDNA轉(zhuǎn)染的細胞中,初步驗證了GM3的生物學(xué)功能(SM

2、-1和CSSH-1分別是質(zhì)粒和B4Gal-T6 cDNA正義鏈轉(zhuǎn)染的單克隆細胞；CM-1和CAH-3是質(zhì)粒和B4Gal-T6 cDNA反義鏈轉(zhuǎn)染的單克隆細胞)。
　　 另外,通過siRNA沉默GM3也表現(xiàn)出與CAH-3相似的調(diào)節(jié)細胞形態(tài)、細胞運動性和生長的特性。細胞變圓并且按照與對照細胞不同的方式生長。GM3合成酶沉默的單克隆細胞B11通過調(diào)節(jié)MMP-9的表達來降低細胞的運動性。然而,與對照細胞相比,細胞內(nèi)的GM3的量降低,細胞

3、的惡性程度加劇。實驗表明,GM3沉默的細胞更易于在不含血清的培養(yǎng)基或軟瓊脂的培養(yǎng)基中生長。
　　 接下來的實驗證明了GM3通過其下游分子Arhgdib來調(diào)節(jié)細胞的生物學(xué)功能。與此同時,經(jīng)過基因篩選發(fā)現(xiàn),Arhgdib是GM3的效應(yīng)因子,GM3通過PI3K/Akt/mTOR途徑來調(diào)節(jié)Arhgdib的表達,尤其是PDK1在Arhgdib的調(diào)節(jié)過程中起到了非常重要的作用。另外,進一步的實驗證明了Arhgdib沉默的細胞中細胞的形態(tài)、細