雙水相萃取消除蛋白質(zhì)對(duì)測(cè)定血漿中藥物影響的研究.pdf

1、血漿中藥物的分析主要包括藥物提取和檢測(cè),現(xiàn)有的科技水平下,儀器基本已經(jīng)能夠滿足測(cè)定的要求,因此制約血漿中藥物濃度檢測(cè)的關(guān)鍵是實(shí)現(xiàn)藥物的快速準(zhǔn)確提取。本文對(duì)現(xiàn)有血漿中藥物的提取技術(shù)進(jìn)行了綜述,以分子熒光光譜法詳細(xì)研究了抗精神病類(lèi)藥物與人血清白蛋白(HSA)的相互作用,以瑞利散射光譜研究了不同濃度乙醇對(duì)蛋白質(zhì)變性的影響,闡明待測(cè)藥物在血清中的存在狀態(tài),為血漿中藥物的提取提供理論依據(jù),并詳細(xì)研究了乙醇-K2HPO4-水雙水相形成的條件并利用該

2、體系測(cè)定酒精類(lèi)飲料的酒精度;利用該體系基質(zhì)去除與高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)技術(shù)建立了檢測(cè)血清樣品中抗精神病類(lèi)等藥物的方法。
　　論文主要分為五部分:
　　第一部分:對(duì)血漿中藥物的提取方法和雙水相體系在藥物萃取等方面的應(yīng)用進(jìn)行綜述,闡明了課題的研究?jī)?nèi)容和意義。
　　第二部分:考察7種常見(jiàn)的無(wú)機(jī)鹽對(duì)乙醇-水溶液產(chǎn)生相分離的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明磷酸氫二鉀分相能力最強(qiáng)。通過(guò)研究常壓、25℃條件下乙醇-K2HPO4-水體系的相圖

3、得知,任意體積分?jǐn)?shù)的乙醇-水溶液均可在加入適量的磷酸氫二鉀后形成雙水相。因此可在酒精類(lèi)飲料中加入磷酸氫二鉀使其形成雙水相后,通過(guò)測(cè)量上相體積來(lái)分析飲料中的酒精含量。葡萄酒中的色素、單寧對(duì)測(cè)定有影響,可籍加入ADS-8吸附樹(shù)脂和鉻皮粉消除。應(yīng)用本方法成功測(cè)定了白酒、葡萄酒、白蘭地酒的酒精度,方法簡(jiǎn)單、快捷,樣品測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3.0％,回收率為99.2%-101.6%,可以滿足酒精類(lèi)飲料酒精度標(biāo)稱(chēng)含量偏差小于±1.0度的分析要求。

4、　　第三部分:以HSA為典型蛋白質(zhì),研究了蛋白質(zhì)對(duì)測(cè)定血清樣品中抗精神病類(lèi)藥物(APDs:安定、鹽酸氯丙嗪及奮乃靜)的影響。以分子熒光光譜法詳細(xì)研究了抗精神病類(lèi)藥物與HSA的相互作用,以瑞利散射光譜研究了不同濃度乙醇對(duì)蛋白質(zhì)變性的影響。研究結(jié)果表明:藥物與HSA存在牢固結(jié)合作用,體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇水溶液作為萃取液可以使血清中蛋白質(zhì)緩慢的變性,從而充分釋放與蛋白質(zhì)結(jié)合的藥物。本文以乙醇水溶液為萃取液提取血清樣品中的APDs,加入K2H

5、PO4無(wú)機(jī)鹽后可形成雙水相體系,APDs進(jìn)入雙水相上相實(shí)現(xiàn)藥物的均相高效萃取。上相經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后可直接用高效液相色譜檢測(cè)。該方法用于人血清中3種抗精神病類(lèi)藥物的萃取檢測(cè),檢出限為18.8~38.4ng·mL-1,回收率為94.2%~98.7%。
　　第四部分:以人血清白蛋白為典型蛋白質(zhì),利用分子熒光光譜法研究了蛋白質(zhì)在不同百分含量乙醇中的溶解度,進(jìn)一步闡明了乙醇對(duì)血漿中藥物萃取的影響。利用乙醇-K2HPO4-水雙水相體系