TNF-α對肥大細胞蛋白酶激活受體表達和介質分泌的影響.pdf

1、蛋白酶激活受體( proteinase activated receptors或 protease activated receptors,PARs),Th2類細胞因子白細胞介素(interleukin, IL)-4,IL-6和IL-13參與過敏反應的發(fā)生,腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α可刺激肥大細胞釋放組胺和類胰蛋白酶等介質而在過敏炎癥中發(fā)揮重要作用。然而TNF-α對肥大細胞PAR表達的影響,肥

2、大細胞被TNF-α刺激后分泌Th2類細胞因子的情況及其信號轉導通路還不甚清楚。因此本研究探討促炎癥細胞因子 TNF-α對肥大細胞 PARs表達以及 IL-4, IL-6和IL-13分泌的影響,并探討可能的信號轉導通路。
　　肥大細胞激發(fā)后,收集各時間點的細胞和上清。細胞處理后采用流式細胞術和實時定量PCR的方法在蛋白水平和mRNA水平檢測PAR-1,PAR-2,PAR-3和PAR-4表達情況,用細胞激發(fā)信號ELISA(cellul

3、ar activation of signaling ELISA,CASE)方法檢測信號轉導通路蛋白Akt,ERK,p38和STAT3磷酸化情況;上清用ELISA方法檢測IL-4,IL-6和IL-13水平。
　　結果顯示:TNF-α上調PAR-1,PAR-2, PAR-3和PAR-4 mRNA在肥大細胞P815的表達;TNF-α以濃度依賴的方式促進肥大細胞P815分泌IL-4、IL-6和IL-13;應用LY294002可以阻斷TN

4、F-α引起的肥大細胞 IL-4、IL-6和IL-13分泌,而PD98059, U0126可以阻斷TNF-α引起的IL-4和IL-6分泌;同時,應用PD98059, U0126和LY294002可以抑制TNF-α引起的ERK和Akt磷酸化。
　　總之,TNF-α可能影響肥大細胞PARs表達并通過激活 Akt和ERK信號轉導通路刺激肥大細胞分泌Th2類細胞因子。這些發(fā)現(xiàn)提示在過敏性炎癥反應中,肥大細胞分泌的TNF-α,可能通過提高肥大