植酸酶基因在畢赤酵母中高效表達(dá)及工程菌培養(yǎng)基初步優(yōu)化.pdf

1、植酸酶是催化植酸及植酸鹽水解成肌醇和無(wú)機(jī)磷酸鹽的一類酶,將其添加到單胃動(dòng)物植物性飼料中,可以釋放植酸中的無(wú)機(jī)磷以及被植酸絡(luò)合的Ca<'2+>、Mg<'2+>、Zn<'2+>等礦物元素和一些蛋白質(zhì),從而解除植酸抗?fàn)I養(yǎng)作用、提高動(dòng)物飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,同時(shí)也減少了動(dòng)物糞便中植酸磷的含量,降低了磷對(duì)環(huán)境的污染程度.研究表明,飼料中添加植酸酶可使其中磷利用率提高60％,糞便中磷排出量減少40％,還可以提高飼料轉(zhuǎn)化率,改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能,因此對(duì)提高養(yǎng)

2、殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益及環(huán)境保護(hù)均具十分重要意義.植酸酶主要存在于微生物和植物中,動(dòng)物體內(nèi)也有少量存在,但真正具有開發(fā)價(jià)值的主要是微生物產(chǎn)生的植酸酶,尤其是曲霉產(chǎn)生的酸性植酸酶.國(guó)外早在1991年就成功地利用DNA重組技術(shù)獲得第一株酸性植酸酶的工程菌,并已投入商品化生產(chǎn).目前已開始從事植酸酶的植物和動(dòng)物基因工程的研究,已成功將植酸酶基因?qū)胲俎?、煙草、小鼠和豬的唾液腺中.國(guó)內(nèi)對(duì)植酸酶的研究起步較晚,到目前為止,植酸酶野生菌株產(chǎn)酶水平低下的問題仍

3、然沒有得到徹底解決,目前市場(chǎng)上應(yīng)用的植酸酶制劑多屬進(jìn)口產(chǎn)品,且價(jià)格昂貴.因此,提高植酸酶野生菌株產(chǎn)酶水平,降低其生產(chǎn)成本,對(duì)實(shí)現(xiàn)植酸酶產(chǎn)品國(guó)產(chǎn)化并獲取自己專利具有十分重要意義.而提高野生菌株產(chǎn)酶水平的主要思路集中在通過基因工程手段克隆植酸酶基因或進(jìn)行適當(dāng)改造,然后將這些優(yōu)良基因?qū)脒m當(dāng)?shù)乃拗骶?進(jìn)一步篩選出高產(chǎn)工程菌株,優(yōu)化發(fā)酵工藝條件從而實(shí)現(xiàn)植酸酶基因的高效表達(dá).因此,該實(shí)驗(yàn)著力于將已構(gòu)建的可進(jìn)行誘導(dǎo)調(diào)控分泌表達(dá)的畢赤酵母整合型表達(dá)載