HLA-B基因多態(tài)性在法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究.pdf

1、 本研究目的是設(shè)計(jì)出一組HLA-B基因特異的SNP位點(diǎn)探針，應(yīng)用PCR-SSOP法和PCR-RFLP法對(duì)中國(guó)北方漢族人群進(jìn)行頻率和家系遺傳規(guī)律調(diào)查，獲得相關(guān)多態(tài)性數(shù)據(jù)；并將探針應(yīng)用于原位雜交技術(shù)中進(jìn)行非創(chuàng)傷性產(chǎn)前父權(quán)鑒定的嘗試，為HLA-B基因多態(tài)性的進(jìn)一步應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法: 根據(jù)已知HLA-B基因序列和各等位基因堿基變異及頻率分布的資料，設(shè)計(jì)2條HLA-B序列特異性DNA探針B009-Z和B095-Z。獲得含有第2外顯子

2、和第3外顯子的HLA-B基因目的片段；篩選最佳斑點(diǎn)雜交條件并通過(guò)PCR-RFLP、PCRSSP以及DNA序列測(cè)定等方法檢驗(yàn)斑點(diǎn)雜交的靈敏度、穩(wěn)定性和特異性；調(diào)查HLA-B基因序列多態(tài)性在中國(guó)北方漢族人群中的頻率分布和家系遺傳規(guī)律；應(yīng)用密度梯度離心法富集孕婦(5例)外周血中的有核細(xì)胞，制成細(xì)胞甩片，與探針B095-Z進(jìn)行原位雜交，并結(jié)合其丈夫斑點(diǎn)雜交結(jié)果進(jìn)行非創(chuàng)傷性產(chǎn)前父權(quán)鑒定的嘗試。 研究表明:B009-Z和B095-Z特異性強(qiáng)、