睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪對慢性應激抑郁模型大鼠海馬BDNF與microRNA-10b表達的影響.pdf

1、背景：
　　睡眠剝奪具有抗抑郁效果發(fā)現(xiàn)已久，但其具體的分子機制尚不明確。據(jù)有關研究表明，抑郁癥的發(fā)生與海馬神經(jīng)元再生障礙有著密切的關系，腦源性營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)在抑郁癥的病理生理機制中發(fā)揮著重要作用，而成為目前研究的重要抗抑郁靶點之一。大量研究報道其可作為檢測治療效果的一個重要指標。MicroRNA(miRNA)是一類在進化上高度保守的內(nèi)源性長約22 nt的非編

2、碼小分子RNA，目前認為，miRNA對神經(jīng)元生成具有決定性作用，大量研究表明miRNA與抑郁癥有著密切的關系，因此，本研究從microRNA-10b與BDNF在抑郁模型大鼠海馬中的表達量變化及其表達關系來探討睡眠剝奪的抗抑郁效果起效機制。
　　目的：
　　(1)對大鼠慢性溫和不可預知應激抑郁模型（Chronic unpredictable mildstress，CUMS）進行行為學評價。研究氯丙咪嗪聯(lián)合睡眠剝奪對抑郁模型大鼠

3、行為學的影響。
　　(2)檢測各組大鼠海馬中BDNF及microRNA-10b的表達及分析它們之間的關系，探討氯丙咪嗪聯(lián)合睡眠剝奪在抗抑郁治療中的作用機制。
　　方法：
　　培育90只雄性SD大鼠，其中10只作為正常對照組，80只采用21天模式化慢性溫和不可預知1應激刺激法建立抑郁模型，成功制模后再進行分組，具體分組如下:正常組（10只）、抑郁組（10只）、睡眠剝奪組（10只）、氯丙咪嗪一周組（10只）、氯丙咪嗪兩周組

4、（10只）、氯丙咪嗪三周組（10只）、睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪一周組（10只）、睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪兩周組（10只）、睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪三周組（10只）。睡眠剝奪時間:第1、8、15天運用多平臺水環(huán)境法進行連續(xù)36h的全睡眠剝奪;氯丙咪嗪灌胃劑量為5mg/kg，1次/d，持續(xù)21d。21天后采用糖水消耗實驗、強迫游泳實驗、Y迷宮實驗及礦場實驗等方法檢測各組大鼠行為學改變情況。采用實時定量PCR法檢測各組大鼠海馬中BDNF基因與microR

5、NA-10b的表達;采用雙熒光報告檢測microRNA-10b與BDNF的關系。
　　結(jié)果：
　　(1)行為學分析:抑郁組大鼠與正常組比較，4項實驗得分都明顯下降（P＜0.05），睡眠剝奪組與抑郁組比較，4項實驗得分都明顯上升(P＜0.05);氯丙咪嗪組與抑郁組比，其中氯丙咪嗪2周組與氯丙咪嗪3周組的4項實驗得分均明顯上升(P＜0.05)，睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪組與抑郁組比，4項實驗得分均明顯上升且睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪組1周組

6、上升最明顯(P＜0.05)。
　　(2)實時定量結(jié)果顯示:抑郁組的BDNF明顯低于正常組(P＜0.01)，而睡眠剝奪組的BDNF高于抑郁組(P＜0.05);氯丙咪嗪組與抑郁組相比，氯丙咪嗪2周組與氯丙咪嗪3周組中BDNF均明顯升高(P＜0.05);睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪組中BDNF均比抑郁組明顯升高(P＜0.05)且睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪組1周組較氯丙咪嗪組均有明顯的升高(P＜0.05)。
　　(3)實時定量結(jié)果顯示，抑郁組的m

7、icroRNA-10b明顯高于正常組(P＜0.01)，而睡眠剝奪組的microRNA-10b低于抑郁組(P＜0.05);氯丙咪嗪組與抑郁組相比，氯丙咪嗪2周組與氯丙咪嗪3周組中microRNA-10b均明顯降低(P＜0.05);睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪組中microRNA-10b均比抑郁組明顯降低(P＜0.05)且睡眠剝奪聯(lián)合氯丙咪嗪組1周組較氯丙咪嗪組均有明顯的降低(P＜0.05)。
　　(4)雙熒光報告結(jié)果顯示BDNF為micro