基于Insulin-IGF-1信號通路探討健脾益智法促進MCAO大鼠神經干細胞增值分化的機制研究.pdf

1、本文基于“脾主運化”理論角度，從理論和實驗兩個角度研究健脾益智法對缺血性腦卒中的治療作用，豐富“脾主運化”理論的科學內涵，探討健脾益智法可能通過能量代謝的角度促進神經干細胞增殖，繼續(xù)深化脾腦相關理論，為中醫(yī)藥臨床防治缺血性腦卒中提供新的思路。理論研究部分，首先對“脾主運化”理論的深層內涵進行研究:完善“脾主運化”理論的概念，提出升清降濁是脾主運化的重要內容、脾胃為樞是脾主運化的內在動力、運谷化營是脾主運化的基本生理、藏營運營是脾主運化的

2、深層氣化;其次，指出“脾藏營充營”和“營舍意主思”是脾主運化在脾腦相關中的作用機制，脾腦相關的關鍵物質是脾運化水谷，化生的營氣;最后，從脾主運化與能量代謝現代應用研究的角度探討了脾腦的相關性。本實驗以MCAO模型（線栓法大鼠大腦中動脈阻斷模型）大鼠為載體，設立空白組、模型組、中藥組、LY294002組、LY294002+中藥組。每組于術后按存活時間又分為以下3個亞組，分別為1d、3d、7d。評估各組大鼠術后2h神經缺損情況，判斷是否造模

3、成功。比較各組大鼠的腦梗死體積、血清胰島素的含量。RT-PCR法比較各組大鼠海馬組織中的PI3K、AKT、PTEN的表達水平，免疫熒光法比較各組大鼠的Brdu、BrdU/GFAP、Brdu/NeuN的表達水平。結果顯示，術后3天，中藥組與LY294002組、LY294002+中藥組比較Brdu免疫熒光陽性細胞數明顯增多;術后7天，LY294002組Brdu免疫熒光陽性細胞數明顯少于模型組、中藥組、LY294002+中藥組。提示健脾益智顆

4、粒能促進缺血側神經干細胞的增殖。中藥組大鼠缺血區(qū)BrdU/GFAP雙染陽性細胞數較LY294002組、LY294002+中藥組明顯增加，提示健脾益智顆粒能促進神經膠質細胞神經的分化。Brdu/NeuN的實驗未見到明顯新生神經元，考慮可能是實驗周期太短，神經干細胞向神經元分化不明顯。中藥組大鼠海馬AKT、PI3K的基因表達較LY294002組升高，中藥組PTEN的基因表達明顯低于LY294002組，提示健脾益智顆粒通過促進PI3K/AKT