淫羊藿苷對大鼠快速擴弓及保持過程中腭中縫骨形成的影響.pdf

1、快速擴弓是正畸醫(yī)生常用的臨床技術(shù)，被用于牙列擁擠、牙弓狹窄及前牙反猞病例的矯治。在快速擴弓過程中，腭中縫在矯形力的作用下被打開，成骨過程被激活，新骨不斷在骨縫邊緣沉積，最終使上頜骨在新的位置上穩(wěn)定下來。然而，盡管快速擴弓的療效已經(jīng)被絕大多數(shù)正畸醫(yī)生所認可，但快速擴弓過程中仍有諸多問題出現(xiàn)，如牙根吸收、牙齦退縮、擴弓量不足、不對稱擴弓以及擴弓后復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)是擴弓治療后最普遍的并發(fā)癥之一。在快速擴弓過程中被打開的骨縫無法在擴弓期和保持期內(nèi)形成

2、充足的骨質(zhì)被認為是導(dǎo)致復(fù)發(fā)的重要原因之一。因此在上頜快速擴弓治療過程中，加速腭中縫骨質(zhì)的形成和沉積是保證快速擴弓效果最重要的環(huán)節(jié)。為此各國學(xué)者嘗試了若干方法促進腭中縫新骨的形成，這些方法包括二磷酸鹽、低能激光、轉(zhuǎn)化生長因子等。然而這些方法不但在操作方法上難以實施，而且花費較高，不易被患者所接受，故難以大規(guī)模用于臨床。
　　近幾年來，傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)開始逐步受到重視。作為中華民族的寶貴遺產(chǎn)，古老的傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)不僅受到國內(nèi)醫(yī)生和患者的青睞，

3、也在逐步吸引著國際學(xué)者的目光。在國內(nèi)外學(xué)者的不斷努力下，越來越多的的中醫(yī)藥被開發(fā)和應(yīng)用。以現(xiàn)代分子生物學(xué)手段研究古老的中醫(yī)藥學(xué)成為當前的熱門課題。在本試驗中我們選取補腎類中藥淫羊藿苷，通過建立大鼠快速擴弓模型，研究補腎類中藥淫羊藿苷對大鼠快速擴弓及保持過程中腭中縫骨形成的影響，從而為增強擴弓效果，減少術(shù)后復(fù)發(fā)提供一條新思路。
　　目的:
　　建立大鼠快速擴弓模型，對建立快速擴弓模型的大鼠灌服淫羊藿苷混懸液后觀察并分析大鼠腭中

4、縫的組織形態(tài)，明確淫羊藿苷對大鼠快速擴弓及保持過程中腭中縫骨形成的影響，為利用傳統(tǒng)中藥增強快速擴弓效果提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　36只雄性Wistar大鼠（6周齡，150+10g）被選取后，統(tǒng)一編號并隨機分為三組。其中A組被設(shè)置為對照組，不進行雙眼圈簧擴弓裝置的安裝。B、C兩組大鼠經(jīng)水合氯醛麻醉以后，以藻酸鹽制取口腔印模并用超硬石膏制作模型。以模型為基礎(chǔ)，用細絲鉗彎制雙眼圈簧裝置，并調(diào)整其力值使其就位后產(chǎn)生100g機械

5、擴張力。再次麻醉大鼠后，把雙眼圈簧裝置用針持固定于大鼠上頜兩側(cè)第一、二磨牙之間的鄰間隙內(nèi)并以光敏樹脂固定。7天后各組隨機處死4只大鼠，剩余大鼠麻醉后以光固化樹脂固定雙眼圈簧的彈性加力部位，進入保持期。剩余大鼠于第14天、21天分別處死，制取上頜標本。所有上頜標本取下后立即測量并記錄上頜左右兩側(cè)第一磨牙中央窩之間的距離。在擴弓及保持過程中，C組大鼠每日灌服20mg/kg的淫羊藿苷混懸液，A、B兩組大鼠根據(jù)體重給以同等量的溶劑（0.5％羧甲

6、基纖維素鈉溶液）。標本脫鈣后行HE及免疫組織化學(xué)染色觀察腭中縫骨組織改建及成骨相關(guān)因子的表達狀況。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠上頜快速擴弓以及保持過程中腭中縫組織的形態(tài)變化
　　觀察HE切片可見，腭中縫中央是由一條狹長的纖維樣細胞帶構(gòu)成，富含纖維、成纖維細胞、骨和軟骨樣前體細胞，細胞呈密集分布，體積較周邊細胞小，可以清晰地看到胞核，胞質(zhì)少。其外側(cè)為軟骨細胞層，細胞體積大，呈卵圓形，胞質(zhì)豐富且染色淺，細胞核大而明顯，呈橢圓

7、形。最外側(cè)為兩側(cè)硬骨板的邊緣，可見骨髓腔。
　　在快速擴弓過程中，大鼠腭中縫被擴寬，腭中縫中央的前體細胞帶被撕裂，正常的細胞和纖維的分布位置被打亂。在部分切片中可以觀察到炎癥反應(yīng)和新生血管的形成。在兩側(cè)硬骨板的邊緣可以看到大量的成骨細胞以及新生的骨組織。進入保持期以后仍能看到部分新生血管，但腭中縫的炎癥反應(yīng)減輕，腭中縫中央的纖維樣組織和細胞趨于回到原來的正常排列。
　　2.上頜寬度度的變化
　　肉眼觀察，B、C兩組大鼠

8、腭中縫被擴開，上頜寬度增大。測量數(shù)據(jù)顯示，與A組大鼠相比，B、C兩組大鼠在各個時間點上頜寬度均明顯增寬(p＜0.05)。然而，B、C兩組之間差異無顯著性(p＞0.05）。
　　3.成骨細胞的數(shù)目變化
　　與A組相比，C組大鼠成骨細胞的數(shù)目在各個時間點均明顯升高，其差異具有顯著性(p＜0.05）。與A組相比，B組大鼠的成骨細胞數(shù)目在各個時間點均升高，然而，僅在第7天時其差異具有顯著性(p＜0.05）。
　　4.BMP-2

9、的表達情況
　　與A組相比，B、C兩組BMP-2的表達量在第7天和第14天時明顯升高，其差異具有顯著性(p＜0.05)，且C組大鼠的表達量與B組相比明顯升高(p＜0.05)。然而，統(tǒng)計學(xué)分析顯示A、B、C三組之間BMP-2的表達量在第21天時無明顯差異(p＞0.05)。
　　5.BMP-4的表達情況
　　與A組相比，B、C兩組BMP-4的表達量在第7、14、21天均顯著上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。C組BMP

10、-4的表達量在各個監(jiān)測點均明顯高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.在大鼠上頜快速擴弓及保持過程中，機械刺激可以激發(fā)大鼠腭中縫BMP-2及BMP-4的表達，隨保持期的延長這種作用逐漸減弱并消失。
　　2.在機械擴張力的作用下，淫羊藿苷可以促進大鼠腭中縫的成骨分化以及BMP-2、BMP-4的表達。
　　3.淫羊藿苷能夠促進上頜快速擴弓及保持過程中腭中縫的骨質(zhì)改建，加速新骨的形成，有利于擴