中藥接骨I號超聲透入對骨折愈合過程中BMP-7表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:建立新西蘭大白兔雙側(cè)橈骨中段骨折的動物模型,觀察中藥超聲透入療法治療橈骨骨折的療效及中藥超聲透入對骨折愈合過程中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7表達(dá)的影響。
　　 方法:構(gòu)建84只健康新西蘭大白兔雙側(cè)橈骨中段3.0 mm骨缺損的骨折模型,建模成功后將實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分成3組(實(shí)驗(yàn)組、超聲組、對照組,每組各28只);實(shí)驗(yàn)組以含接骨Ⅰ號(主要成分為:紅花、桃紅、桂枝、川芎、乳香、沒藥、元胡、鍛自然銅、續(xù)斷、狗脊等)的自制中藥超聲耦合劑行中藥低強(qiáng)

2、度脈沖超聲透入治療;超聲組每日于骨折部位以普通超聲耦合劑(不含接骨Ⅰ號)行低強(qiáng)度脈沖超聲治療;對照組予以無超聲信號輸出的超聲探頭行假刺激治療。分別于術(shù)后3、6、9、12、15天取骨折局部組織行RT-PCR和免疫組織化學(xué)檢測,分別從基因和蛋白水平了解各組骨折局部BMP-7的表達(dá)差異。術(shù)后4、6周經(jīng)耳緣靜脈麻醉后行X線檢查以觀察不同治療方法對骨折愈合的療效差異,然后處死實(shí)驗(yàn)動物以骨折部位為中心截取2.0 cm長橈骨標(biāo)本制作石蠟組織切片,行H

3、E染色,從組織學(xué)角度進(jìn)一步了解骨折的愈合情況。
　　 結(jié)果: X線片檢查顯示實(shí)驗(yàn)組骨折愈合快于超聲組及對照組,超聲組骨折愈合快于對照組。HE切片所見骨折愈合情況與X線片觀察結(jié)果一致。RT-PCR提示:術(shù)后3天,BMP-7灰度值/內(nèi)參β-actin灰度值在實(shí)驗(yàn)組高于對照組(P＜0.05);術(shù)后6、9、12天BMP-7 mRNA表達(dá)逐漸增強(qiáng),實(shí)驗(yàn)組均高于超聲組及對照組(P＜0.05),其中在術(shù)后6、9、12天實(shí)驗(yàn)組BMP-7表達(dá)與對

4、照組差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)、術(shù)后12天實(shí)驗(yàn)組與超聲組表達(dá)差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);術(shù)后15天對照組呈現(xiàn)下降趨勢。免疫組織化學(xué)結(jié)果提示:術(shù)后3天起各組BMP-7表達(dá)水平逐漸增強(qiáng),實(shí)驗(yàn)組于術(shù)后15天呈現(xiàn)下降趨勢;術(shù)后3天,實(shí)驗(yàn)組BMP-7表達(dá)強(qiáng)于對照組(P＜0.05);術(shù)后第6、9、12、15天實(shí)驗(yàn)組均強(qiáng)于超聲組及對照組(P＜0.05),其中術(shù)后9、12天實(shí)驗(yàn)組與對照組表達(dá)差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)