XIAP蛋白UBA和BIR2結構域的核磁共振研究.pdf

1、X-染色體相關的凋亡抑制蛋白(XIAP)，是IAP家族中最有效的Caspase抑制劑，全長有497個氨基酸，分子量約57 kDa，包括3個BIR結構域、一個RING結構域和一個UBA結構域。BIR結構域是一個大約有70個氨基酸殘基并且有一個鋅指結構片段，位于XIAP蛋白的N端。BIR1結構域可以激活下游TAK1信號途徑；BIR2/BIR3結構域可以有效地結合并抑制caspase-3、caspase-7及caspase-9的活性。碳末端R

2、ING結構域可以作為泛素連接酶E3酶，能夠介導XIAP自身以及與它相互作用的蛋白分子泛素化，以抑制細胞的凋亡。XIAP的UBA結構域相對BIR結構域和RING結構域被發(fā)現(xiàn)的相對晚一些，研究的也少。UBA位于BIR3結構域與RING結構域之間，約有80個氨基酸殘基，并能夠與Ubiqutin相互作用。Ubiqutin除經典界面殘基發(fā)生化學位移以外，還有尾端殘基。尾端殘基是否與UBA結合還不清楚。本論文在第二章通過高分辨核磁共振技術，詳細的探

3、究了野生型Ubiquti以及尾端切掉后Ubiqutin與UBA結合狀態(tài)，測定了結界面上的殘基以及結合常數(shù)，發(fā)現(xiàn)尾端切掉后Ubiqutin與UBA結合力變弱，說明尾端在結合中起重要的作用。
　　本文為探究XIAP與銅的作用機制，截取XIAP的BIR2結構域作為研究對象，對BIR2野生型及突變體的表達與純化進行了探索，并獲得了15N同位素標記穩(wěn)定的可溶蛋白，利用高分辨核磁共振得到了野生型及突變體的2D1H-15N HSQC譜圖，為下一