利用淋巴細胞培養(yǎng)法評估人體維生素需求量的技術及其應用.pdf

1、維生素是維持人體生長發(fā)育和代謝不可缺少的物質，缺乏時會影響正常生理機能，從而對人體健康造成影響。維生素需求評估是人體健康評估的一部分。由于人體對維生素的需求量受多種因素的影響，目前常用的評估方法在反映個性化需求方面存在不足。本論文利用細胞培養(yǎng)技術，將被評估對象的淋巴細胞置于一系列培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，通過對比細胞在含不同維生素的培養(yǎng)基中增值能力的差異，來對個體的六種維生素需求進行評估。
　　目的:建立利用細胞培養(yǎng)技術評估人體六種維生素

2、需求情況的方法，并對本方法的有效性進行研究。
　　方法:配制一系列的培養(yǎng)基，其中包括完全培養(yǎng)基、六種缺失不同的維生素（維生素B1，B2，B12，葉酸，泛酸，生物素）缺失型培養(yǎng)基。將人的淋巴細胞自血液中分離后接種于以上培養(yǎng)基中進行72h的培養(yǎng)，隨后利用氚標記胸腺嘧啶核苷摻入法對細胞的增殖情況進行檢測。實驗對培養(yǎng)基中植物血凝素的濃度、細胞接種量、培養(yǎng)時間、同位素標記時間、同位素標記濃度等各實驗條件進行了優(yōu)化。通過四例樣本的重復實驗，對

3、本方法的可行性進行了初步驗證。隨后增加研究規(guī)模，對119例樣本進行檢測，計算各樣本的R值(R值=細胞在缺失型培養(yǎng)基中的讀數平均值/細胞在完全培養(yǎng)基中的讀數平均值×100)。篩選出R值水平最低的樣本，進行為期一個月的維生素補充后，對干預的效果及檢測方法的有效性進行評價。
　　結果:利用完全培養(yǎng)基、六種維生素缺失型培養(yǎng)基對四例樣本進行四次檢測，各維生素四次重復的CV不超過16％;同一種維生素的R值在志愿者間存在明顯的差異;對119人進