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文檔簡介
1、目的:骨髓間充質干細胞目前已經成為重要的組織工程種子細胞,而若想深入研究MSCs在體內外增殖、分化的規(guī)律首先需要解決如何能高效、安全地標記MSCs問題。本文通過觀察SPIO及DAPI對大鼠骨髓間充質干細胞的雙標記效果及其對細胞存活、增殖以及凋亡的影響,為間充質干細胞的活體示蹤研究奠定基礎。
方法:分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質干細胞,用SPIO及DAPI雙標記后分別用普魯士藍染色法和激光共聚焦顯微鏡觀察其鐵標記率及熒光標記率。用臺
2、盼藍檢測細胞活力;MTT法檢測標記干細胞增值力;Calcein-AM/PI以及AO/PI雙染細胞,檢測細胞存活率以及凋亡率。
結果:SPIO及DAPI在體外雙標記大鼠骨髓間充質干細胞效率高,幾乎達100%;臺盼藍染色顯示標記細胞的存活率為97%;MTT法檢測發(fā)現(xiàn)雙標記干細胞組的活力以及增殖力與未標記干細胞組相比差異均無顯著性意義(P>0.05);Calcein-AM/PI染色,未標記細胞及雙標記細胞的存活率分別為96%和9
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