骨髓基質干細胞種植入去細胞同種異體神經構建獼猴組織工程化神經的實驗研究.pdf

1、本實驗將體外分離培養(yǎng)的獼猴BMSCs與去細胞同種異體神經支架復合，并移植入獼猴橈神經缺損處，檢測BMSCs在體內的分化、遷徙及其對周圍神經再生的作用，闡明BMSCs對修復獼猴周圍神經缺損的重要意義。 第一章：獼猴骨髓基質干細胞體內分化為類雪旺細胞及示蹤研究 1.方法: 1.實驗動物： 6只3歲雄性獼猴(n=12)，隨機分為兩組：實驗組(BMSCs-1aden組，n=6)與對照組(rlone—cell—la

2、den組，n=6)。 2.BMSCs的分離培養(yǎng)、鑒定及BrdU標記： 3.化學萃取獼猴腓總神經、自體BMSCs與去細胞同種異體神經體外復合并植入體內： 4.術后8周行神經電生理檢測及神經移植物的組織形態(tài)學及免疫熒光檢測。 結論： 1.自體骨髓基質干細胞植入獼猴周圍神經缺損后，仍可存留于神經移植物內并保持活性；骨髓基質干細胞可在體內誘導分化為類雪旺細胞并促進神經再生。 2.骨髓基質干細胞

3、與去細胞同種異體神經復合物可提供比單純去細胞同種異體神經更適宜周圍神經再生的環(huán)境。 第二章：骨髓基質干細胞與去細胞同種異體神經復合修復獼猴橈神經2.5cm缺損的實驗研究 方法: 1.實驗動物 15只3歲雄性獼猴(n=30)，體重3.2Kg至4.0Kg，隨機分為5組，每組6例：BMSCs—laden組;SCs—laden組;autograft組;non—cell-1aden;negative contr

4、ol組。 2.種子細胞(BMSCs，SCs)的培養(yǎng) BMSCs分離與培養(yǎng)方法如第一章所述。 3.化學萃取腓總神經及自體BMSCs(或SCs)與去細胞同種異體神經體外復合并植入體內切取獼猴腓總神經并將其切為3cm長片段進行萃取，步驟如第一章所述。萃取后將每段神經修剪為2.5am長，放入PBS液中4℃保存。 4.術后5個月，觀察神經功能恢復情況，行神經電牛理檢測及神經移植物、肌肉組織的形態(tài)學檢測。