青黛提取物對(duì)HEL細(xì)胞增殖、凋亡和分化的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:研究青黛有效成分在體外對(duì)HEL(humanerythroleukemia)細(xì)胞的增殖、凋亡和分化的作用;
   方法:1.青黛有效成分提?。翰捎么继岱ㄌ崛∏圜煊行С煞郑芙庥诙讈嗧颗渲瞥跏紳舛葹?0mg/mL。2.細(xì)胞培養(yǎng):HEL細(xì)胞用含10%小牛血清的RPMI1640液體培養(yǎng)基37C,5%CO2常規(guī)培養(yǎng)。3.MTT還原實(shí)驗(yàn):取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的HEL細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度為0.5×106~1×106/mL,與不同濃度青黛提取物

2、藥液混合培養(yǎng),觀察青黛有效成分對(duì)HEL細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng)。4.光學(xué)顯微鏡下觀察青黛有效成分作用前后HEL細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變;5.凋亡檢測(cè):流式細(xì)胞術(shù)AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記法檢測(cè)青黛有效成分對(duì)HEL細(xì)胞的早期凋亡誘導(dǎo)作用。6.細(xì)胞分化檢測(cè):流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HEL細(xì)胞CD14和CD11b的表達(dá)情況,觀察HEL細(xì)胞單核系分化趨勢(shì);
   結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示25,50,75及100μg/mL藥物對(duì)HEL細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率

3、分別為16.01%,39.12%,50.06%和59.28%(P均<0.01);2.光學(xué)顯微鏡下觀察青黛有效成分作用后,部分HEL細(xì)胞的形態(tài)呈凋亡改變;3.青黛有效成分可誘導(dǎo)HEL細(xì)胞早期凋亡:25,50,75及100μg/mL藥物對(duì)應(yīng)的HEL早期凋亡率分別是5.60%,13.7%,17.8%和18.4%,明顯高于對(duì)照細(xì)胞的自發(fā)凋亡率(2.70%);4.與陰性對(duì)照組相比25,50,75和100μg/mL青黛有效成分作用下HEL細(xì)胞均出現(xiàn)

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