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文檔簡介
1、該課題克隆了杜氏鹽藻雙拷貝碳酸酐酶(DCA1)和碳酸酐酶(CA1)基因的啟動(dòng)子,并對(duì)其功能進(jìn)行了分析.結(jié)果表明,DCA1基因啟動(dòng)子可驅(qū)使外源的抗除草劑基因(bar)在杜氏鹽藻細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá),CA1基因啟動(dòng)子可驅(qū)使外源的bar基因在杜氏鹽藻細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá).而且DCA1基因啟動(dòng)子還受氯化鈉濃度梯度調(diào)控,是一種新的高滲休克誘導(dǎo)性啟動(dòng)子.結(jié)論:1通過巢式PCR和跨內(nèi)含子PCR方法,首次克隆得到了DCA1和CA1基因的5'上游區(qū)、3'下游區(qū)和跨內(nèi)
2、含子基因組DNA序列,而5'上游區(qū)序列可能還是杜氏鹽藻兩種新的碳酸酐酶基因的啟動(dòng)子區(qū)序列.2基因組步行方法(巢式PCR)是尋找已知cDNA周圍未知基因組DNA序列的較好方法.3首次克隆得到的DCA1基因啟動(dòng)子可能是一種活性高、安全性好的高滲誘導(dǎo)性啟動(dòng)子;4杜氏鹽藻DCA1和DC1基因啟動(dòng)子區(qū)的GT高度重復(fù)序列,可能與杜氏鹽藻高度耐鹽的分子機(jī)制有關(guān).5在氦氣壓力為100psi條件下微彈轟擊2次,可能是基因槍方法轉(zhuǎn)化杜氏鹽藻的較好轉(zhuǎn)化條件.
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