少棘蜈蚣最細(xì)粉急性毒性和慢性毒性研究.pdf

1、目的：中藥蜈蚣為傳統(tǒng)的毒性動(dòng)物藥材，而臨床常用其最細(xì)粉，即少棘蜈蚣最細(xì)粉，但蜈蚣體內(nèi)所含的毒性成分使得機(jī)體中毒后常出現(xiàn)肝腎功能損害、神經(jīng)系統(tǒng)中毒反應(yīng)及過敏反應(yīng)等。本文通過小鼠急性毒性試驗(yàn)及大鼠3月慢性毒性試驗(yàn)，探討少棘蜈蚣最細(xì)粉的安全性，如毒性反應(yīng)劑量、毒性反應(yīng)的類型和可能的毒性靶器官，旨在為臨床用藥及確定安全劑量提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：(1)小鼠急性毒性試驗(yàn)：預(yù)試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)少棘蜈蚣最細(xì)粉Dm（100％致死劑量）為12.0

2、0g/kg，Dn（0％致死劑量）為6.00g/kg，如果實(shí)驗(yàn)組數(shù)為6組，計(jì)算出劑量比r=1.148，從而正式實(shí)驗(yàn)劑量由低到高確定為：6.00g/kg、6.89g/kg、7.91g/kg、9.08g/kg、10.43g/kg、12.00g/kg。昆明種小鼠每組20只，分為6組，共120只，按雌雄各50％，苦味酸標(biāo)記編號(hào)。將0.30g/ml的少棘蜈蚣最細(xì)粉混懸液等比稀釋成6個(gè)濃度水平的混懸液，按給藥容積0.4ml/10g，于24小時(shí)內(nèi)，分別

3、灌胃給藥。觀察并記錄給藥后14天的小鼠情況：毛色狀況、精神狀況、活動(dòng)狀況、飲食情況、排便情況，五官分泌物有無異常，毒性反應(yīng)表現(xiàn)，毒性反應(yīng)大小，毒性反應(yīng)開始時(shí)間，維持時(shí)間等、中毒反應(yīng)恢復(fù)情況，以及各組小鼠死亡率。采用LD50計(jì)算軟件計(jì)算LD50（半數(shù)致死量）。(2)大鼠3月慢性毒性試驗(yàn)：SD大鼠120只，實(shí)驗(yàn)環(huán)境下喂養(yǎng)1周，隨機(jī)分為陰性對(duì)照組，以及少棘蜈蚣最細(xì)粉高、中、低劑量組，每組雌性大鼠15只，雄性15只。連續(xù)灌胃不同劑量的少棘蜈蚣最

4、細(xì)粉（0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg，分別為臨床常用劑量10倍、20倍、40倍）和等容量的生理鹽水。每日定時(shí)給藥1次，每周給藥5日，連續(xù)給藥12周，于給藥4周、12周和恢復(fù)2周，檢測(cè)血液學(xué)指標(biāo)：HCT（Hematocrit，紅細(xì)胞比容）、MCH（mean corpuscular volume，紅細(xì)胞平均血紅蛋白量）、HGB（Hemoglobin，血紅蛋白濃度）、LYMPH（Lymphocyte，淋巴細(xì)胞絕對(duì)值）、LYMP

5、H％（Lymphocyte ratio，淋巴細(xì)胞比率）、MCHC（mean corpuscular hemoglobin concentration，紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度）、MCV（mean corpuscular volume，平均紅細(xì)胞體積）、MONO％（Monocytes，單核細(xì)胞比率）、MPV（mean platelet volume，血小板平均體積）、NEUT％（Neutrophilic granulocyte，中性粒細(xì)胞比

6、率）、PCT（Platelet hematocrit，血小板壓積）、PDW（Platelet distribution width，血小板分布寬度）、PLT（Platelet，血小板計(jì)數(shù)）、RBC（Red blood cell，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)）、RDW（Red blood cell distribution width，紅細(xì)胞分布寬度）、WBC（White blood cell，白細(xì)胞計(jì)數(shù)），檢測(cè)生化指標(biāo)：BUN(Blood urea ni

7、trogen，血尿素氮)、ALB（Albumin，白蛋白）、ALT(Alanine aminotransrease，谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、AST（Aspartate aminotransferase，谷草轉(zhuǎn)氨酶）、CK（Creatine kinase，肌酸激酶）、CREA（Creatinine，肌酐）、Glu（Glucose，葡萄糖）、TBIL（Total blood cell，總膽紅素）、TCHO(Total cholesterol,總膽固醇

8、)、TG（Triacylglycerol，甘油三酯）、TP(Total protein，總蛋白)、Cl（Chloridion氯）、Na（Naloridion鈉）、K（Potassiumion鉀），對(duì)各臟器進(jìn)行臟器指數(shù)計(jì)算和病理學(xué)檢查。
　　結(jié)果：(1)小鼠急性毒性試驗(yàn)：少棘蜈蚣最細(xì)粉灌胃后各組小鼠中毒癥狀相似，在高劑量組觀察到尿失禁，抽搐，痙攣等毒性反應(yīng)。死亡小鼠主要臟器（肝臟、脾臟、腎臟、心臟、肺等）肉眼觀察未見異常。觀察14天

9、后，統(tǒng)計(jì)各劑量組動(dòng)物死亡數(shù)，采用軟件計(jì)算LD50，少棘蜈蚣最細(xì)粉對(duì)小鼠的LD50為8.8218g/kg，95％置信區(qū)間為8.3800g/kg≤LD50≤9.2870g/kg。小鼠死亡情況未發(fā)現(xiàn)性別差異性。(2)大鼠3月慢性毒性試驗(yàn)：少棘蜈蚣最細(xì)粉在給藥第6周后對(duì)大鼠體重增長(zhǎng)有一定的抑制作用，恢復(fù)期逐漸恢復(fù);給藥4周，少棘蜈蚣最細(xì)粉2.0g/kg組僅有RBC（Red blood cell，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)）低于陰性對(duì)照組，而給藥12周后，0.5

10、、1.0、2.0g/kg組大鼠RBC（Red blood cell，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)）、HGB（Hemoglobin，血紅蛋白測(cè)定）降低，PLT（Platelet，血小板計(jì)數(shù)）、PCT(Platelet hematocrit，血小板壓積)升高，但恢復(fù)期可恢復(fù)正常;給藥4周，2.0g/kg組BUN(Blood urea nitrogen，血尿素氮)、CREA（Creatinine，肌酐）高于陰性對(duì)照組，其它各血生化指標(biāo)無明顯變化，而給藥12周，

11、0.5、1.0、2.0g/kg組AST(Aspartate aminotransferase，谷草轉(zhuǎn)氨酶)、ALT(Alanine aminotransrease，谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、CK（Creatine kinase，肌酸激酶）、BUN（Blood urea nitrogen，血尿素氮）、CREA（Creatinine，肌酐）均高于陰性對(duì)照組，恢復(fù)期有所下降，但2.0g/kg組CK（Creatine kinase，肌酸激酶）、BUN(Bl

12、ood urea nitrogen，血尿素氮)、CREA（Creatinine，肌酐）仍未恢復(fù)正常;0.5g/kg組恢復(fù)期腎臟臟器指數(shù)低于陰性對(duì)照組，其余各組各臟器指數(shù)無明顯變化;對(duì)各組臟器進(jìn)行病理組織學(xué)切片檢查，結(jié)果表明，給藥第4周，檢查發(fā)現(xiàn)2.0g/kg組1例腎臟輕度纖維化。給藥第12周，檢查發(fā)現(xiàn)①腎臟病變：2.0g/kg組1例輕度纖維化，0.5g/kg、1.0g/kg組各1例腎輕度水腫。②肝臟病變：1.0g/kg、2.0g/kg組

13、各1例輕度水腫。③肺臟病變：2.0g/kg組1例輕度炎癥。④睪丸病變：2.0g/kg組睪丸凝固性壞死1例?；謴?fù)期，①腎臟病變：1.0g/kg組1例輕度纖維化，2.0g/kg組1例輕度炎癥，1例重度纖維化。②肝臟病變：1.0g/kg、2.0g/kg組輕度水腫各1例。
　　結(jié)論：少棘蜈蚣最細(xì)粉對(duì)小鼠損害主要涉及呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)，小鼠LD50為8.8218g/kg(8821.8mg/kg)，95％置信區(qū)間為8.3800g/kg～9.2