清除巨噬細胞減輕大鼠同種心臟移植慢性排斥反應.pdf

1、目的:器官移植是現(xiàn)代醫(yī)學治療終末期疾病的重要手段，需求逐漸增長，供需矛盾越來越突出。盡管由于新的免疫抑制劑的出現(xiàn)，以及器官保存方法、外科技術(shù)和圍手術(shù)期處理等方面的改善，器官移植物的存活率明顯提高，但患者的遠期存活率遠不能使人滿意。慢性排斥反應是移植物功能喪失的主要原因，是移植中的關(guān)鍵問題，目前尚無有效解決辦法，其機理復雜，仍不甚明了。哺乳動物的巨噬細胞具有多功能性及明顯的異質(zhì)性，有兩種顯著不同的活化模式:M1、M2。M1與炎癥和組織損傷

2、相關(guān)，依賴IFN-γ、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12及多種趨化因子等;M2與抗炎、組織維持和修復相關(guān)，依賴Arg1、Ym1、IL-4、IL-10、IL-13等。巨噬細胞可能作為抗原提呈細胞、釋放細胞因子和活性物質(zhì)以及作為效應細胞等參與移植排斥反應。本研究旨在探究巨噬細胞在大鼠心臟移植慢性排斥反應中的作用以及可能的機制，期望能給解決慢性移植排斥提供理論依據(jù)和方法。
　　方法:首先以Lewis大鼠(LEW RT11)為受體

3、、Fi sher(F344，RT1v1)為供體，建立腹腔異位心臟移植模型。受體術(shù)后10天給予環(huán)孢素A預防急性排斥反應。以氯膦酸二鈉脂質(zhì)體清除巨噬細胞，干預1組持續(xù)2周，干預2組持續(xù)4周。以應用PBS脂質(zhì)體為對照。術(shù)后滿4周處死大鼠。抽取外周血以做混合淋巴細胞反應。獲取移植心臟標本，分別進行H&E染色及彈力纖維染色;免疫組化檢測ED1、Arg1、Ym1、IFN-γ、TNF-α、α-SMA、MCP-1、IL-10;PCR檢測IFN-γ、TN

4、F-α、MCP-1。分析結(jié)果，試圖闡明巨噬細胞在大鼠心臟移植慢性排斥反應中的作用并分析可能的機制。
　　結(jié)果:(1)成功建立了大鼠心臟移植慢性排斥反應模型，表現(xiàn)為特征性的心臟移植物血管病和心肌纖維化。(2)與對照組相比，術(shù)后2周內(nèi)清除巨噬細胞，術(shù)后4周時的巨噬細胞Arg1、Ym1、IL-10表達明顯增高(分別p＜0.05、p＜0.01、p＜0.001)，IFN-γ、TNF-α、MCP-1（均p＜0.001）表達明顯降低，表現(xiàn)為M2

5、特征。(3)與對照組相比，術(shù)后2周內(nèi)清除巨噬細胞，術(shù)后4周時CAV明顯減輕(p＜0.05)，α-SMA表達減少，心肌纖維化程度顯著減低(p＜0.001)。(4)與術(shù)后2周內(nèi)清除巨噬細胞相比，術(shù)后4周內(nèi)清除巨噬細胞，IFN-γ、MCP-1表達顯著降低（均p＜0.001），CAV和心肌纖維化程度明顯減輕(分別p＜0.05、p＜0.001)，但是TNF-α表達沒有明顯變化(p＞0.05)。
　　結(jié)論:巨噬細胞在大鼠心臟移植慢性排斥中發(fā)揮