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1、本文研究了飼料中添加不同水平芽孢桿菌(Bacillus spp.)對(duì)草魚(yú)(Ctenopharyngodon idellus)表觀(guān)消化率、腸道與肝胰臟消化酶活性及蛋白酶組成的影響。試驗(yàn)魚(yú)共分為4組。對(duì)照組(Ⅰ)投喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上分別添加1×108CFU/g、3×108CFU/g、5×108CFU/g芽孢桿菌,飼喂60d,主要研究結(jié)果如下:
1.持續(xù)投喂30d后,開(kāi)始收集糞便測(cè)定各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表
2、觀(guān)消化率。與對(duì)照組相比,Ⅱ組的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分表觀(guān)消化率,Ⅲ組干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪表觀(guān)消化率和Ⅳ組粗蛋白、粗脂肪表觀(guān)消化率均顯著提高(P<0.05),其中Ⅱ組的表觀(guān)消化率最高。芽孢桿菌添加量與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀(guān)消化率最符合一元二次曲線(xiàn)方程,隨著芽孢桿菌添加量的增加,草魚(yú)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀(guān)消化率呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。經(jīng)擬合的曲線(xiàn)計(jì)算,草魚(yú)對(duì)干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分表觀(guān)消化率達(dá)到最佳效果的芽孢桿菌添加量分別為2.39×108
3、CFU/g、1.69×108CFU/g、2.38×108CFU/g、1.56×108CFU/g。
2.持續(xù)投喂30d后,Ⅱ組中腸和Ⅱ、Ⅲ組肝胰臟蛋白酶活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05);Ⅱ組前腸和后腸淀粉酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ組后腸脂肪酶活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),持續(xù)投喂60d后,也有相似的結(jié)果。表明日糧中添加芽孢桿菌后草魚(yú)前腸淀粉酶、草魚(yú)中腸3種消化酶活性、后腸淀粉酶和脂肪酶以及肝胰臟
4、蛋白酶活性顯著升高(P<0.05);添加1-3×108CFU/g芽孢桿菌草魚(yú)腸道和肝胰臟消化酶活性可達(dá)最高,而添加5×108CFU/g芽孢桿菌草魚(yú)腸道和肝胰臟消化酶活性則下降,表明消化酶活性隨芽孢桿菌添加量的增加上升到一定程度時(shí),便維持在一定水平或下降,而隨著投喂時(shí)間的延長(zhǎng),消化酶活性也不會(huì)持續(xù)升高,反而會(huì)有所下降。雙因子方差分析表明,芽孢桿菌的添加量對(duì)中腸、后腸和肝胰臟蛋白酶活性,前腸、中腸和后腸淀粉酶活性,中腸和后腸脂肪酶活性均有顯
5、著影響(P<0.05);投喂時(shí)間對(duì)肝胰臟蛋白酶活性和淀粉酶活性有顯著影響(P<0.05)。
3.持續(xù)投喂60d后,利用SDS-底物-PAGE電泳技術(shù)鑒定芽孢桿菌對(duì)草魚(yú)消化器官蛋白酶組成和相對(duì)含量的影響。與對(duì)照組相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組后腸蛋白酶組成增加了HP2和HP4兩種,分子量分別為24.9KDa、27.8KDa,酶帶HP5-HP9的相對(duì)含量比對(duì)照組有明顯的增加;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組中腸蛋白酶組成增加了MP5一種,分子量為32.4KD
6、a,酶帶MP2、MP4、MP6的相對(duì)含量比對(duì)照組有明顯的增加;前腸與肝胰臟蛋白酶的組成無(wú)變化,但Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組前腸蛋白酶酶帶FP2、FP4-FP7的相對(duì)含量比對(duì)照組有明顯的增加,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組肝胰臟蛋白酶酶帶LP7的相對(duì)含量比對(duì)照組有明顯的增加,而酶帶LP6、LP5和LP3的相對(duì)含量比對(duì)照組有明顯的減少。這一結(jié)果表明在飼料中添加芽孢桿菌促進(jìn)草魚(yú)消化蛋白酶活性上升的機(jī)理主要在于芽孢桿菌促進(jìn)了宿主消化酶的分泌,而芽孢桿菌分泌的胞外蛋白酶則不是主
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