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文檔簡介
1、 本實驗對HeLa細胞進行不同因子處理,首先測定最佳的應激處理條件,然后在確定應激條件的基礎上,分別測定細胞HSP70表達、細胞增殖及凋亡情況,旨在探討不同應激處理下HeLa細胞凋亡、增殖與HSP70表達的關系,以及HSP70影響凋亡的可能通路,以闡明其在細胞應激反應信號轉導通路和細胞增殖與熱應激調(diào)控中的作用與機制。本實驗主要分為兩部分: 一、不同熱處理對HeLa細胞增殖、凋亡和HSP70表達的影響 通過對HeLa細胞
2、不同溫度下的熱處理,觀察不同溫度處理后細胞活率、凋亡及HSP70表達的情況。結果表明,各實驗組細胞均出現(xiàn)凋亡;45℃處理對細胞的抑制作用最強,表達HSP70量最高,43℃次之,41℃最低。41℃、43℃熱處理HSP70表達高峰出現(xiàn)在24h;45℃熱處理HSP70表達高峰出現(xiàn)在30h,此結果為進一步探討HSP70蛋白對細胞生存、增殖及熱耐受性的機制提供了依據(jù)。 二、激素、化學物質(zhì)對HeLa細胞增殖、凋亡和熱休克蛋白70表達的影響
3、 本試驗以地塞米松(dexamethasone,Dex)、吐溫-80(Tween-80)、氨茶堿(Aminophylline)、乙二胺四乙酸(EDTA)、Ca2+、雙氧水(H2O2)為應激源,旨在探討不同應激處理下HeLa細胞凋亡、增殖及HSP70表達的特點和規(guī)律,以及HSP70可能的表達通路。結果表明,Dex(10-3~10-6mol/L)、Ca2+和H2O2劑量依賴性的抑制HeLa細胞增殖;Tween-80濃度在1﹪(v/v)
4、和0.1﹪時對HeLa細胞增殖抑制差異極顯著;EDTA濃度在10-2、10-3時對HeLa細胞增殖抑制作用較對照組差異極顯著;Aminophylline對HeLa細胞增殖的影響不呈現(xiàn)劑量依賴性。HeLa細胞經(jīng)應激處理后,除EDTA處理組未出現(xiàn)凋亡外,其余組均見DNA降解,形成梯形條帶;各處理組HSP70表達較對照組有所提高,其中雙氧水和氨茶堿處理組與對照組相比差異極顯著,Dex和Tween-80處理組與對照組相比差異顯著,EDTA和Ca
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