福建省花生瘡痂病病原菌的初步研究.pdf

1、花生瘡痂病(peanut scab disease)是一種常見的花生病害，該病的病原菌是花生痂囊腔菌(Elsino?arachidis(Bitanc.&Jenkins) Rossman&W.C. Allen)，無性階段為花生痂圓孢(Sphaceloma arachidis Bitanc.&Jenkins)。由于在我國發(fā)現(xiàn)較晚，國內(nèi)關(guān)于該病原菌的相關(guān)研究報(bào)道較少。
　　基于此，本研究對花生瘡痂病病原菌進(jìn)行了系統(tǒng)研究，包括形態(tài)學(xué)和分子

2、系統(tǒng)鑒定，生物學(xué)特性及其與其他痂囊腔菌(包括無性型痂圓孢屬真菌)的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，并建立了該病害的快速診斷體系。研究結(jié)果如下：
　　(1)從福建省福州市和龍巖市采集花生瘡痂病樣品，通過切片鏡檢的方法進(jìn)行初步鑒定，后分離純化得到了5個純菌株，再通過形態(tài)學(xué)和ITS序列的分子系統(tǒng)發(fā)育分析，最終確定我省花生瘡痂病的病原菌也是花生痂囊腔菌(E. arachidis)。
　　(2)對E. arachidis(菌株號LY-HS-1，采自龍巖

3、)的生物學(xué)特性進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，E. arachidis適宜生長溫度為23℃-27℃，葡萄糖、蔗糖和可溶性淀粉均可作為培養(yǎng)基的碳源，酵母膏可作為培養(yǎng)基的氮源，該菌在酸性條件下(pH4.5-6.5)生長較快。溫度和營養(yǎng)物質(zhì)影響菌落形態(tài)和菌絲生長速率，而酸堿度只影響菌絲的生長速率，對菌落形態(tài)沒有明顯影響。
　　(3)對E. arachidis及痂囊腔菌屬其他種類，包括無性階段痂圓孢屬，進(jìn)行8個基因的多基因(包括ITS，LSU，SSU

4、，TEF，CHS，mtSSU，actin和β-tublin)序列的系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果表明：SSU和LSU這兩個基因不能很好將痂囊腔菌屬及其無性態(tài)的不同種區(qū)分開，因此在對該屬及其無性階段進(jìn)行種間劃分的時候，這兩個基因不宜作為候選基因；ITS和TEF這兩個基因可以將這些不同的種區(qū)分開來，并在一定程度上反映了痂囊腔菌屬及其無性態(tài)菌物的種間親緣關(guān)系，但這些親緣不是特別清楚，因此在鑒定該屬的種時可以選擇這兩個基因，但在分析該屬種間親緣關(guān)系的時候還

5、需結(jié)合其他基因一起分析；由于其他4個基因目前在 GenBank里的序列較少，沒法做系統(tǒng)發(fā)育分析，只對本研究中所得的序列進(jìn)行了分析，其中CHS基因序列在E. arachidis和E. fawcettii種內(nèi)存在一定程度的變異，可作為研究E. arachidis和E. fawcettii種內(nèi)變異的候選基因，其他3個基因在不同的物種之間也存在差異，但差異較小。
　　(4)建立了E. arachidis的快速鑒定方法，可以在發(fā)病癥狀不明顯