赤芝與紫芝種間雜交.pdf

1、本研究通過原生質(zhì)體單核化技術(shù)分別獲得赤芝和紫芝的單核菌株，隨后進(jìn)行單單雜交以獲取不同于親本的雜交菌株。隨后對(duì)獲取的雜交菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)和分子標(biāo)記鑒定，并通過生物學(xué)特性和藥用成分分析篩選出具有雜交優(yōu)勢(shì)的靈芝雜交菌株。
　　 1.親本的選擇及單核菌株的制備
　　 結(jié)合實(shí)驗(yàn)室已有的靈芝相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，我們挑選出3株赤芝和4株紫芝菌株作為種間雜交實(shí)驗(yàn)的親本菌株。隨后通過原生質(zhì)體單核化技術(shù)分別獲取了不同交配型的赤芝單核菌株22株和紫芝

2、單核菌株39株，并進(jìn)行了相應(yīng)的交配型測(cè)定。
　　 2.單單雜交實(shí)驗(yàn)
　　 將不同交配型的赤芝與紫芝單核菌株進(jìn)行單單雜交，共計(jì)858個(gè)配對(duì)組合，共獲得8株赤芝與紫芝的種間雜交菌株，其配對(duì)成功率為0.9324％。
　　 3.雜交菌株的鑒定
　　 首先，利用鎖狀聯(lián)合的觀察、核染色以及拮抗反應(yīng)等方法對(duì)獲得的雜交菌株進(jìn)行初步鑒定，隨后又通過ITS酶切、SRAP和RAPD等分子標(biāo)記的方法對(duì)雜交菌株進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證，實(shí)

3、驗(yàn)結(jié)果顯示雜交菌株明顯不同于兩株雙核親本菌株，其遺傳物質(zhì)分別源自于兩株不同的單核親本菌株。
　　 4.雜交菌株生物學(xué)特性的研究
　　 通過對(duì)所獲得的雜交菌株的溫度、pH值、生長(zhǎng)速度和栽培管性狀等四個(gè)方面進(jìn)行分析比較，結(jié)果顯示：雜交菌株03+1-51×07-5在30℃下菌絲生長(zhǎng)速度最快，達(dá)到4.68mm/d；雜交菌株03+1-18×07-42在pH7時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度最快，達(dá)到4.50mm/d；雜交菌株12-71×05-1是在