轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β對(duì)成骨細(xì)胞增殖、BMP-2及Cbfal基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 初步研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）在體外對(duì)小鼠顱蓋骨成骨細(xì)胞增殖及骨形態(tài)蛋白-2(BMP-2)及核心結(jié)合因子Al(Cbfal)mRNA表達(dá)的影響，探討轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子作用于成骨細(xì)胞的可能機(jī)制，為臨床供一定的理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1．培養(yǎng)小鼠成骨細(xì)胞，并觀察其形態(tài)和功能。
　　 2．不同濃度轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(0、0.01、100ng/ml)作用于原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細(xì)胞, 采用MTT(噻唑

2、藍(lán))比色法測(cè)定培養(yǎng)液OD值。
　　 3．不同濃度轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(0、0.01、100ng/ml)干預(yù)原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細(xì)胞，通過(guò)RT一PCR方法檢測(cè)BMP-2和Cbfal的表達(dá)水平。
　　 4．統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)以x±s表示，采用spssl3.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，組間比較用LSD—t檢驗(yàn)；方差不齊，組間比較用Dunnett T3法檢驗(yàn),P<0．05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　

3、1．體外培養(yǎng)的小鼠成骨細(xì)胞大多呈長(zhǎng)梭形，堿性磷酸酶組織化學(xué)染色陽(yáng)性，培養(yǎng)液中加入β一甘油磷酸鈉及L一抗壞血酸后鈣茜素紅染色陽(yáng)性。
　　 2．不同濃度轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(0、0.01、100ng/ml)作用于原代培養(yǎng)的成骨細(xì)胞24小時(shí)后可促進(jìn)其增值，OD值顯著增加P<0.05，TGF-β可明顯促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖。
　　 3．通過(guò)半定量RT-PCR 檢測(cè)原代培養(yǎng)的成骨細(xì)胞BMP-2和CbfalmRNA的表達(dá)。結(jié)果顯示，隨著轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)