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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
通過(guò)觀察藁本內(nèi)酯干預(yù)巨噬細(xì)胞(macrophage,MΦ)模型中細(xì)胞蛋白髓樣分化因子88(MyD88)與Toll樣受體4(TLR4)以及腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)等炎癥因子的表達(dá),探討藁本內(nèi)酯在熱休克蛋白60(heat shock proteins60,HSP60)誘導(dǎo)活化為MΦ泡沫化后穩(wěn)定易損斑塊的部分分子學(xué)機(jī)制。
方法:
將人血單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株(THP-1)經(jīng)佛波酯(
2、PMA)誘導(dǎo)形成巨噬細(xì)胞(MΦ)后,隨機(jī)分為MΦ組、HSP60組、藁本內(nèi)酯組三個(gè)組別:第一組用PMA誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞株使其成為MΦ,然后提取細(xì)胞蛋白及上清液;第二組用PMA誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞株使其成為MΦ,用HSP60干預(yù)后提取收集細(xì)胞蛋白及上清液;第三組用PMA誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞使其成為MΦ,用藁本內(nèi)酯干預(yù)48h后再用HSP60干預(yù)后提取收集細(xì)胞蛋白及上清液。采用蛋白印跡法(Western Blot)檢測(cè)細(xì)胞蛋白MyD88及TLR4
3、的表達(dá),采用免疫酶聯(lián)吸附法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞上清液中炎癥因子(TNF-α、IL-6)的濃度。
結(jié)果:
1.藁本內(nèi)酯組較HSP60組能夠顯著抑制THP-1源性MΦ中細(xì)胞蛋白TLR4、MyD88蛋白的表達(dá);
2.藁本內(nèi)酯組較HSP60組顯著下調(diào)THP-1源性MΦ上清中IL-6、TN F-α炎癥因子的濃度
結(jié)論:
藁本內(nèi)酯可通過(guò)“HSP60-TLR4/MyD88-MΦ”途徑明顯抑制MΦ泡沫
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