非小細(xì)胞肺癌患者新鮮細(xì)胞學(xué)標(biāo)本基因檢測及臨床意義.pdf

1、目的：隨著腫瘤分子生物學(xué)的發(fā)展，靶向治療以其選擇性高、副作用小、療效好的特點(diǎn)，在腫瘤治療中占據(jù)了越來越重要的地位，尤以非小細(xì)胞肺癌靶向治療的效果最為顯著，但并不是對所有病人都有效，對一小部分有EGFR敏感突變和ALK融合基因陽性的病人療效較好，因此NSCLC患者在接受靶向治療前，需進(jìn)行基因突變檢測。目前，用于基因檢測的標(biāo)本大多采用腫瘤組織的石蠟標(biāo)本，但晚期患者很難獲得。因此，本研究擬采用新鮮的胸腹水和針吸等細(xì)胞學(xué)標(biāo)本進(jìn)行基因突變的檢測。

2、預(yù)計完成以下目的：
　　1、探討采用NSCLC患者的細(xì)胞學(xué)標(biāo)本檢測EGFR基因和ALK基因的優(yōu)勢以及EGFR基因突變情況與臨床特癥之間的關(guān)系；
　　2、探討采用細(xì)胞學(xué)標(biāo)本檢測的EGFR基因敏感突變的NSCLC患者一線運(yùn)用TKI藥物后的療效和生存期分析，并與以往文獻(xiàn)報道的采用腫瘤組織石蠟標(biāo)本檢測的EGFR基因敏感突變患者應(yīng)用TKI后的療效和生存期相比較。
　　方法：
　　1、收集河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院癌檢中心的針吸和

3、胸腔積液標(biāo)本376例，經(jīng) HE染色、免疫細(xì)胞化學(xué)染色后由兩位細(xì)胞病理醫(yī)師先確診，并記錄患者的性別、年齡、吸煙情況、病理類型、標(biāo)本類型等。
　　2、對其中293例針吸和胸水標(biāo)本采用ARMS法進(jìn)行EGFR基因18-21外顯子突變的檢測，觀察突變情況并分析其與臨床特征的關(guān)系。
　　3、23例肺腺癌胸水標(biāo)本經(jīng)細(xì)胞采集器富集細(xì)胞，直接涂片后采用FISH法觀察EML4-ALK基因融合情況。
　　4收集采用細(xì)胞學(xué)標(biāo)本檢測的 EGFR

4、敏感突變的 NSCLC患者138例，根據(jù)一線用藥情況分為A組（靶向治療組44例）、B組（靶向治療加化療組45例）和 C組（化療組49例），并比較各組客觀有效率（ ORR）、疾病控制率（ DCR）、無進(jìn)展生存期（ PFS）、總生存期（OS）和年生存率。
　　結(jié)果：
　　1、HE染色找到癌細(xì)胞361例，免疫細(xì)胞化學(xué)染色確診為NSCLC患者316例。這316例患者中針吸標(biāo)本102例，胸腔積液標(biāo)本214例；腺癌307例，鱗癌9例。<

5、br>　　2、EGFR基因突變檢測結(jié)果：293例進(jìn)行檢測患者中，288例提取DNA成功，提取成功率約為98.3％， EGFR基因總的突變率為45.1%（130/288）。其中18號、19號、20號、21號外顯子突變例數(shù)占總突變例數(shù)的百分比分別為3.8%（5/130）、46.2%（60/130）、3.8%（5/130）、46.2%（60/130）。男性患者突變率為37.2%（55/148），女性患者突變率為53.6%（75/140），兩者

6、之間有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.005）。年齡≥60歲的患者突變率為45.8%（71/155），年齡﹤60歲的患者突變率為44.4%（59/133），兩者之間無統(tǒng)計學(xué)差異（ P=0.806）。吸煙患者突變率為35.5%（33/93），不吸煙患者突變率為49.7%（97/195），兩者之間有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.023）。腺癌患者突變率為46.2%（129/279），鱗癌患者突變率為11.1%（1/9），兩者之間有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.044）。細(xì)

7、針穿刺標(biāo)本的突變率為37.4%（37/99），胸腔積液標(biāo)本的患者突變率為49.2%（93/189），兩者之間無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.055）。
　　3、EML4-ALK基因檢測結(jié)果:23例胸水標(biāo)本，其中陽性3例，陽性率為13.0%。3例陽性患者的平均年齡為50歲,且全部為腺癌，男性1例，有吸煙史;女性2例，均無吸煙史。
　　4、應(yīng)用TKI藥物的療效和生存期情況：A組、B組和C組的ORR分別為81.8%、80%和30.6%， D

8、CR分別為93.2%、86%和71.4%，中位PFS分別為9.5個月、7.5個月和6個月，中位OS分別為19.5個月、13.25個月和9個月，年生存率分別為52.3%、33.3%、28.5%。靶向治療組與靶向治療加化療組的療效和生存期都優(yōu)于化療組，與以往文獻(xiàn)報道采用腫瘤組織石蠟標(biāo)本檢測的EGFR基因敏感突變患者應(yīng)用TKI后的療效和生存期相符。
　　結(jié)論：
　　1、運(yùn)用新鮮細(xì)胞學(xué)標(biāo)本采用ARMS法檢測的 NSCLC患者的EGF

9、R基因突變與以往文獻(xiàn)報道的運(yùn)用石蠟標(biāo)本檢測的突變率基本一致，且克服了傳統(tǒng)測序法靈敏度偏低以及福爾馬林和石蠟對 DNA提取和 PCR擴(kuò)增的不利影響，具有較高的的實用性和準(zhǔn)確率。
　　2、NSCLC患者的 EGFR基因突變主要集中在女性、不吸煙、腺癌的人群中，與年齡無關(guān)。
　　3、在NSCLC患者的EGFR突變中，胸腔積液標(biāo)本比針吸標(biāo)本突變率稍高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4、EML4-ALK基因已成為 NSCLC患者治療