NF-кB信號通路在誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向肝樣細胞分化中的表達.pdf

1、目的：研究nuclear factor-kappa B(NF-кB)信號通路在肝細胞生長因子(HGF)、β-神經(jīng)生長因子(β-NGF)、肝組織液介導下髓間充質(zhì)干細胞向肝樣細胞定向分化的作用。
　　方法：全骨髓貼壁法分離大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，使用10％胎牛血清的DMEM低糖培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，將傳至第三代的髓間充質(zhì)干細胞分成8組：誘導對照組，HGF誘導組，β-NGF誘導組，肝組織液(LTF)誘導組，抑制對照組，HGF抑制誘導組，β-NG

2、F抑制誘導組，肝組織液(LTF)抑制誘導組。分別加入等量含血清培養(yǎng)液，HGF，β-NGF，肝組織液誘導劑，BAY11-7082(NF-кB抑制劑)，HGF和BAY11-7082，β-NGF和BAY11-7082，肝組織液誘導劑和 BAY11-7082。20天后進行吲哚靛青綠（ICG）攝取檢測已分化的肝細胞，免疫熒光染色檢測NF-кB，蛋白質(zhì)印跡檢測NF-кB和AAT的表達。
　　結(jié)果：HGF誘導組、β-NGF誘導組和肝組織液(LT

3、F)誘導組中出現(xiàn)分化成圓形的肝細胞，可以攝取ICG，免疫印跡檢測顯示alpha-1-antitrypsin(AAT)表達，并且免疫熒光檢測顯示NF-кB已被激活移位至胞核，而HGF抑制誘導組，β-NGF抑制誘導組，肝組織液(LTF)抑制誘導組吲哚靛青綠陽性率和AAT表達量顯著性降低，免疫熒光檢測和免疫印跡檢測結(jié)果顯示NF-кB陽性率和表達量分別對比HGF誘導組，β-NGF誘導組和肝組織液(LTF)誘導組也顯著性降低。
　　結(jié)論：H