厚樸酚抑制HL-60細胞增殖和誘導凋亡的作用與分子機制研究.pdf

1、背景：厚樸酚（magnolol）是木蘭科植物厚樸(Magno liaoffic inalis)的有效成分,具有中樞神經(jīng)抑制、抗菌、抗炎、抗氧化及抑制血小板聚集等多方面的藥理作用。近年來的研究證實厚樸酚具有較好的體外抗腫瘤作用，可抑制包括甲狀腺癌細胞、人膀胱癌細胞、神經(jīng)膠質瘤細胞、卵巢癌細胞、前列腺癌細胞等多種惡性腫瘤細胞，且其抗腫瘤效應具有多靶點、多途徑的特點。但是厚樸酚對白血病細胞的抑制作用卻鮮有報道。惡性腫瘤通常有細胞周期和凋亡調(diào)節(jié)

2、異常，目前普遍認為細胞通過增殖、分化和死亡共同調(diào)節(jié)細胞生長，其中任意一環(huán)節(jié)發(fā)生異常都會導致不可控的生長或死亡。此研究以急性髓系白血病 HL-60細胞為研究對象，觀察了厚樸酚對 HL-60細胞增殖、細胞周期及凋亡的影響，并且初步探討其作用機制，為臨床應用厚樸酚治療急性髓系白血病提供實驗依據(jù)。目的：本研究旨在觀察厚樸酚對人急性髓系白血病HL-60細胞增殖和凋亡的影響，并初步探討其作用機制。
　　方法：采用MTT法檢測不同濃度厚樸酚（5

3、、10、20、40、80和160μg/ml）作用于HL-60細胞24 h和48 h后的細胞增殖情況；在光學顯微鏡下觀察HL-60細胞形態(tài)學的變化；DAPI染色后在熒光顯微鏡下觀察細胞核形態(tài)學變化； Annexin V/PI雙染后采用流式細胞術檢測HL-60細胞凋亡的改變；Western blot檢測凋亡相關基因caspase-8、caspase-9的蛋白表達和 caspase-3剪切片段的表達變化；分別采用逆轉錄-聚合酶鏈式反應（RT-

4、PCR）檢測Bcl-2家族Bcl-2和Bax的mRNA水平變化。
　　結果：厚樸酚能明顯抑制HL-60細胞的增殖，并隨時間延長及劑量增加，細胞增殖抑制率也呈明顯升高趨勢，P＜0.05； HL-60細胞經(jīng)厚樸酚處理后體積明顯變小、且有凋亡小體的產(chǎn)生，細胞核的固縮、碎裂，呈現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)學改變；40μg/ml厚樸酚處理HL-60細胞24 h后細胞早期凋亡率為（11.7±2.4）％，與對照組（1.4±1.1）%相比，具有顯著統(tǒng)計學差異