心肌IK1激動劑zacopride抗左甲狀腺素致大鼠心室重構(gòu)作用的研究.pdf

1、目的：
　　探討心肌內(nèi)向整流鉀通道（IK1）激動劑zacopride對左甲狀腺素致大鼠心室重構(gòu)的抑制作用及可能的機制。
　　方法：
　　SD大鼠，隨機分為對照組，左甲狀腺素模型組，zacopride5，15，50μg·kg-1干預(yù)組、zacopride（15μg·kg-1）+氯喹（7.5μg·kg-1）組和卡托普利陽性對照組。連續(xù)給藥10天。超聲測量大鼠左室舒張期內(nèi)徑（LVIDd），左室收縮期內(nèi)徑（LVIDs），室間隔

2、厚度（IVS），左室射血分?jǐn)?shù)（EF）和左室短軸縮短率（FS）；測心肌肥厚指數(shù)；HE和Masson’s染色觀察各組心肌結(jié)構(gòu)，分析細(xì)胞橫截面積和膠原沉積率；Langendorff離體灌流和膠原酶法急性分離成年大鼠單個左心室肌細(xì)胞，全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)測量各組IK1電流，L-型鈣通道（ICa-L）電流的變化；激光共聚焦顯微鏡觀察Fluo-4負(fù)載細(xì)胞形態(tài)，測胞內(nèi)游離鈣離子濃度（[Ca2+]i）；蛋白免疫印跡技術(shù)（Western blot）檢測心肌組

3、織KCNJ2，CaMKII，p-CaMKII，SERCA2，cleaved caspase-3蛋白的變化。
　　結(jié)果：
　　1.與對照組比，左甲狀腺素模型組全心和左心肥厚指數(shù)明顯增加，LVIDd、LVIDs增大，IVS增厚， EF和FS明顯降低（P<0.01）；心肌纖維增粗，排列紊亂，細(xì)胞外基質(zhì)膠原沉積（P<0.01）。提示動物心肌肥厚，心臟纖維化及心功能不全。而zacopride可有效逆轉(zhuǎn)左甲狀腺素所致心室重構(gòu)（P<0.0

4、1），其效應(yīng)與公認(rèn)的抗重構(gòu)藥物卡托普利相似（P>0.05）。應(yīng)用低劑量氯喹選擇性阻斷IK1可消除zacopride的抗心室重構(gòu)作用（P<0.01）。
　　2.與對照組比，左甲狀腺素模型組IK1電流減小，ICa-L增加（P<0.01）；心室肌細(xì)胞增寬，肥大，[Ca2+]i增高（P<0.01），提示心肌發(fā)生電重構(gòu)。應(yīng)用zacopride干預(yù)后可使IK1增大，ICa-L減小，恢復(fù)或接近至生理水平（P<0.01）；細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]i降低

5、（P<0.01）。小劑量氯喹選擇性阻斷IK1可消除zacopride的作用（P<0.01）。
　　3.Western blot結(jié)果顯示，與對照組比，左甲狀腺素模型組心室肌Kir2.1蛋白下調(diào)（P<0.05）；細(xì)胞內(nèi)鈣依賴性調(diào)節(jié)蛋白比例失衡，CaMKII活性增強，SERCA2被抑制，活化的caspase-3表達(dá)增強（P<0.05）。在zacopride干預(yù)后，心肌Kir2.1表達(dá)增加，抑制CaMKII的活性而增強SERCA2表達(dá)，使

6、鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)蛋白恢復(fù)平衡，并抑制caspase-3的激活（P<0.05）。小劑量氯喹選擇性阻斷IK1可消除zacopride的作用（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1)Zacopride可通過選擇性激動心肌IK1，逆轉(zhuǎn)左甲狀腺素鈉所致心室重構(gòu)。
　　2)Zacopride可能通過選擇性激動心肌IK1，減輕胞內(nèi)鈣超載，抑制Ca2+激活的心室重構(gòu)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，并抑制心肌細(xì)胞凋亡，這是zacopride抗心室重構(gòu)的細(xì)胞和分子