《傷寒論》泄熱三方對(duì)AS模型大鼠炎癥機(jī)制影響的比較研究.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化類疾病的發(fā)病率在我國(guó)乃至全世界呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì),從最初的脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說(shuō)到當(dāng)今的炎癥學(xué)說(shuō),國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)工作者從未間斷過(guò)對(duì)其發(fā)病機(jī)制的研究。既往及現(xiàn)有的研究結(jié)果一致認(rèn)為,動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的形成與發(fā)展與脂質(zhì)沉積、動(dòng)脈內(nèi)皮損傷、血管平滑肌細(xì)胞遷移及增殖、血小板的聚集、炎性因子的異常分泌等因素密切相關(guān)。隨著研究的深入,炎癥及免疫機(jī)制在AS的形成、發(fā)展過(guò)程中起著越來(lái)越重要的作用,控制或阻斷炎性機(jī)制通路及抑制炎癥因子的表達(dá),正成為防治AS

2、新的研究方向。
　　 近些年來(lái)祖國(guó)醫(yī)學(xué)防治AS類疾病的療效已得到醫(yī)學(xué)界的認(rèn)可,許多經(jīng)方被應(yīng)用于AS類疾病的臨床治療,其治療AS的基礎(chǔ)及臨床研究均取得了一定的進(jìn)展。但當(dāng)今大多數(shù)學(xué)者偏重于從血瘀、痰濁等方面進(jìn)行論治,而從熱毒辨治的報(bào)道相對(duì)較少。中醫(yī)清熱解毒類藥物有類似于西藥“抗炎”的作用,且其治療AS的作用機(jī)制亦有相關(guān)基礎(chǔ)性研究報(bào)道。針對(duì)當(dāng)前中西醫(yī)學(xué)者對(duì)AS病理實(shí)質(zhì)所提出的熱毒致病和炎癥學(xué)說(shuō),立足于炎癥機(jī)制的角度,在應(yīng)用活血及化痰藥

3、物的同時(shí)使用清熱解毒類藥物,或在西醫(yī)常規(guī)降脂的基礎(chǔ)上聯(lián)合清熱解毒類藥物,可為中西醫(yī)結(jié)合防治AS類疾病提供一個(gè)新的切入點(diǎn)。
　　 目的
　　 桃核承氣湯、小陷胸湯、大黃黃連瀉心湯是《傷寒論》中總體上具有清泄邪熱作用三首經(jīng)方,然又根據(jù)其組方不同,三方在泄熱的同時(shí)分別側(cè)重于活血、化痰、清熱三個(gè)方面。既往的實(shí)驗(yàn)及臨床研究報(bào)道發(fā)現(xiàn),三方均有防治AS類疾病的作用。本實(shí)驗(yàn)旨在探討《傷寒論》三方對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-

4、κB)及其所介導(dǎo)的炎癥因子之間的影響作用,以探明泄熱類經(jīng)方對(duì)AS類疾病炎癥機(jī)制的作用機(jī)理。同時(shí),也從側(cè)重活血、化痰、清熱三個(gè)不同方面觀察《傷寒論》三方對(duì)炎癥機(jī)制作用的不同,為臨床防治AS類疾病提供理論依據(jù),具有一定的理論及臨床意義。
　　 方法
　　 1.理論研究:通過(guò)文獻(xiàn)梳理祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)AS病名、病機(jī)的認(rèn)識(shí);探討中醫(yī)傳統(tǒng)病因?qū)W、中醫(yī)臟腑病變與AS的關(guān)系。梳理《傷寒論》三方歷代臨床研究及現(xiàn)代抗AS的實(shí)驗(yàn)研究情況。
　

5、　 2.實(shí)驗(yàn)研究:通過(guò)建立大鼠AS模型,觀察《傷寒論》三方對(duì)AS炎癥機(jī)制的影響作用,比較三方作用的差異。具體方法如下:
　　 ①通過(guò)病理切片觀察AS大鼠主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)的改變;觀測(cè)主動(dòng)脈內(nèi)膜、中膜厚度的改變情況;
　　 ②運(yùn)用ELISA法檢測(cè)AS大鼠血清中ox-LDL、VCAM-1、IL-6濃度;
　　 ③運(yùn)用免疫比濁法測(cè)定AS大鼠血清CRP含量;
　　 ④運(yùn)用免疫組化法測(cè)定AS大鼠主動(dòng)脈中CD40表達(dá)水平

6、;
　　 ⑤運(yùn)用Western blot法測(cè)定AS大鼠主動(dòng)脈中NF-κB表達(dá)情況。
　　 結(jié)果
　　 1.通過(guò)理論研究及整理發(fā)現(xiàn):祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化的形成與心、肝、脾、腎、肺密切相關(guān),總體上為本虛標(biāo)實(shí)之證;瘀血、痰濁、氣滯、熱毒、濕熱是其形成的主要病理因素;《傷寒論》三方從臨床及實(shí)驗(yàn)研究來(lái)看均有防治AS的作用。
　　 2.通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn):
　　 ①光鏡下觀察《傷寒論》三方AS大鼠主動(dòng)脈切片

7、發(fā)現(xiàn):三方均能保護(hù)動(dòng)脈內(nèi)皮,明顯抑制平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,抑制炎性細(xì)胞的分泌和浸潤(rùn),阻止動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。通過(guò)對(duì)中藥組大鼠主動(dòng)脈切片內(nèi)膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)厚度統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn),三方IT、MT的數(shù)值與病理模型組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。組間比較發(fā)現(xiàn),桃核承氣湯組IT、MT數(shù)值與其它兩組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 ②通過(guò)對(duì)《傷寒論》三方AS大鼠血清ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP的檢

8、測(cè)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn):中藥組大鼠ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP的水平與病理模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。組間比較發(fā)現(xiàn):小陷胸湯組ox-LDL的水平與其它兩組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);桃核承氣湯組VCAM-1的水平與其它兩組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);大黃黃連瀉心湯組IL-6的水平與其它兩組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);桃核承氣湯組、大黃黃瀉心湯組CRP水平與小陷胸湯組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05),桃核承氣湯組

9、、大黃黃瀉心湯組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 ③通過(guò)對(duì)《傷寒論》三方AS大鼠主動(dòng)脈CD40的陽(yáng)性光密度值統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn):中藥組大鼠CD40的水平與病理模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。組間比較發(fā)現(xiàn):桃核承氣湯組、大黃黃瀉心湯組CD40水平與小陷胸湯組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);桃核承氣湯組、大黃黃瀉心湯組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 ④通過(guò)對(duì)《傷寒論》三方AS大鼠主動(dòng)脈NF

10、-κB的Western blot檢測(cè)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn):中藥組大鼠NF-κB的水平與病理模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。經(jīng)組間比較發(fā)現(xiàn):桃核承氣湯組NF-κB水平與其它兩方有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 ⑤用直線相關(guān)分析中藥組NF-κB與ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP、CD40之間的直線相關(guān)系數(shù)(r),結(jié)果為:桃核承氣湯組:0.872、0.854、0.861、0.897、0.811(P＜0.05);小陷胸湯

11、組:0.892、0.754、0.844、0.654、0.731(P＜0.05);大黃黃連瀉心湯組:0.677、0.737,0.878、0.891、0.802(P＜0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1.《傷寒論》三方均能有效地抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。其中,桃核承氣湯對(duì)AS大鼠主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變的保護(hù)作用相對(duì)最好。
　　 2.《傷寒論》三方不但對(duì)NF-κB、ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP、CD40等單個(gè)