纈沙坦對(duì)糖尿病大鼠足細(xì)胞保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：觀(guān)察纈沙坦對(duì)糖尿病大鼠足細(xì)胞相關(guān)蛋白 podocin 表達(dá)的影響，初步探討腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)抑制劑對(duì)糖尿病大鼠足細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制。
　　方法：將 36 只健康雄性 SD 大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組糖尿病大鼠模型采用化學(xué)藥物誘導(dǎo)法制備，即用大劑量鏈脲佐菌素（STZ）單次腹腔注射誘導(dǎo)建立。糖尿病大鼠模型制備成功后，將其隨機(jī)分為糖尿病模型組、纈沙坦干預(yù)組。8 周后分別檢測(cè)各組大鼠糖化血紅蛋白（HbA1C）、尿

2、白蛋白（UALB）、尿肌酐（UCR）、尿視黃醇結(jié)合蛋白（URBP）及腎臟肥大指數(shù)（KI）的變化，并計(jì)算尿白蛋白/肌酐（UACR）和尿視黃醇結(jié)合蛋白/肌酐（UBCR），每周監(jiān)測(cè)各組血糖（BG）；8 周后利用光鏡及電鏡觀(guān)察大鼠腎臟病理及足細(xì)胞形態(tài)變化；采用免疫組化、RT-PCR法分別檢測(cè)腎組織podocin蛋白和 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1．8 周后，與正常對(duì)照組比較，糖尿病模型組和纈沙坦干預(yù)組糖尿病大鼠 BG、HbA

3、1C、UACR、UBCR、KI均明顯增高（P<0.01）；與糖尿病模型組比較，纈沙坦干預(yù)組除BG及HbA1C外，UACR、UBCR、KI均明顯降低（P<0.01）。
　　2．8周后，免疫組化結(jié)果顯示可見(jiàn)正常對(duì)照組 podocin沿腎小球毛細(xì)血管袢呈線(xiàn)性分布，且強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)；糖尿病模型組podocin分布不均勻，表達(dá)明顯減弱或缺失。糖尿病模型組平均光密度值(AOD 值)明顯低于正常對(duì)照組（P＜0.01）；纈沙坦干預(yù)組AOD值明顯高于糖

4、尿病模型組(P＜0.01)，差異有顯著性。
　　3．8 周后，光鏡下觀(guān)察，糖尿病模型組腎小球體積增大，系膜基質(zhì)增生，細(xì)胞外基質(zhì)增加；纈沙坦干預(yù)組上述病理改變較糖尿病模型組明顯得到改善。
　　4. 8 周后，電鏡下觀(guān)察，正常對(duì)照組足細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，基底膜均勻，無(wú)增厚；糖尿病模型組足突增寬、融合，足細(xì)胞數(shù)減少、甚至消失，基底膜增厚；與糖尿病模型組比較，纈沙坦干預(yù)組上述病變程度有不同程度減輕，可見(jiàn)足細(xì)胞數(shù)恢復(fù)，少量足突細(xì)胞融合，基底

5、膜無(wú)明顯增厚。與正常對(duì)照組比較，糖尿病模型和纈沙坦干預(yù)組大鼠腎小球GBM平均厚度、足突融合率、FPW明顯升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；纈沙坦干預(yù)組上述指標(biāo)與糖尿病模型組比較明顯下降，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　5. 8周后，經(jīng)RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)各組大鼠腎皮質(zhì)中podocin mRNA水平吸光度值分析顯示，糖尿病模型組大鼠腎皮質(zhì)表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組（P＜0.01）；纈沙坦干預(yù)組大鼠表達(dá)顯著高于糖尿病模型組（