巴氯芬及γ-氨基丁酸與蛋白質的相互作用研究.pdf

1、藥物與人類生活密不可分。研究藥物的療效、分布、代謝、毒副作用對于評價藥物、新藥研發(fā)等方面都有重要意義。巴氯芬是γ-氨基丁酸的脂溶性衍生物，屬于神經遞質類藥物。主要用于骨骼肌松馳，解痙攣及外傷等。Γ-氨基丁酸是中樞神經系統(tǒng)中的抑制性神經遞質，可用于治療咳嗽和肺部過敏等癥狀。研究兩者藥效的文章非常多，但是對于兩者在體內的與其他蛋白質的結合和毒副作用的文章非常少。針對這一問題，本文以這兩種藥物為研究對象，運用光譜等其他方法研究它們與蛋白質的相

2、互作用。從更微觀層面研究兩種藥物與不同蛋白質的作用，對于更深入的了解藥物的功效提供了一些數據。具體工作如下：
　　 1、用紫外—可見吸收光譜法與核磁共振法研究β-環(huán)糊精對巴氯芬的包結行為。用摩爾比法和直線擬合法確定了包結物的化學計量比為1：1。計算了主客體在不同溫度下的包結常數K，從而得到了包結過程的熱力學數據ΔH，ΔS。結果表明包結過程是自發(fā)的運動，主要驅動力為疏水作用力。用熒光光譜研究了巴氯芬與包結物對牛血清白蛋白的相互作用

3、，結果表明，巴氯芬及包結物對BSA會產生靜態(tài)猝滅。其中巴氯芬與BSA的主要作用為疏水作用，而包結物對BSA的主要作用為靜電作用，這是由于β-環(huán)糊精將巴氯芬的疏水部分包結的結果。
　　 2、研究巴氯芬及γ-氨基丁酸與牛血清白蛋白的結合及金屬離子的影響。Γ-氨基丁酸能夠改變牛血清白蛋白π→π*躍遷的電子能級差，使牛血清白蛋白的紫外光譜發(fā)生藍移。兩者在32s左右就能較為穩(wěn)定的結合。通過紅外光譜法表征可得，巴氯芬和γ-氨基丁酸都能夠改變

4、牛血清白蛋白的二級結構。熒光光譜法和紫外光譜法研究表明：巴氯芬與牛血清白蛋白結合的結合不屬于非輻射共振能量轉移。探討了部分金屬離子對巴氯芬與牛血清白蛋白的結合的影響。結果表明，正常的金屬離子濃度是保證巴氯芬與牛血清白蛋白結合的必要條件。
　　 3、采用熒光光譜法和紫外可見吸收光譜法研究了巴氯芬與胃蛋白酶的結合。觀測到巴氯芬使胃蛋白酶的最大紫外吸收峰藍移。由Stern-Volmer方程求得其熒光猝滅類型為靜態(tài)猝滅，求出結合常數，由

5、熱力學參數判斷其作用力主要為疏水作用。根據非輻射能量轉移理論，胃蛋白酶與巴氯芬之間發(fā)生了能量轉移，從而使胃蛋白酶發(fā)生了熒光猝滅。用紅外光譜法研究了巴氯芬對胃蛋白酶的影響，結果表明，巴氯芬改變了胃蛋白酶的二級結構。利用胃蛋白酶的催化性質研究巴氯芬對胃蛋白酶活性的影響，結果表明，巴氯芬抑制了胃蛋白酶46.50％的活性。
　　 4、研究了巴氯芬與細胞色素C間的結合。巴氯芬能夠使細胞色素C發(fā)生增色效應。同步熒光法結果表明，巴氯芬會使細胞