PPARγ激動劑吡格列酮對哮喘小鼠氣道重塑的影響.pdf

1、目的：采用卵清蛋白(OVA)建立哮喘小鼠氣道重塑模型，觀察過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)激動劑吡格列酮對哮喘小鼠氣道重塑及肺組織脂聯(lián)素表達的影響。
　　方法：1.將24只C57小鼠使用編號抽簽法隨機分為哮喘組、吡格列酮組、正常對照組，哮喘組和吡格列酮組在0、7、14天利用卵清蛋白腹腔注射致敏，第21天用2％OVA滴鼻激發(fā)，每周3次，持續(xù)8周，正常對照組給予相同容積生理鹽水致敏和激發(fā)，方法同上，吡格列酮組給予吡格列酮[1

2、0mg/(kg.d)]灌胃，激發(fā)時每次激發(fā)前1小時灌胃，哮喘組、正常對照組均給予相同容積生理鹽水灌胃。2.實驗結束時麻醉處死各組小鼠，眼球取血測血糖。3.HE染色觀察肺組織病理改變。4.Masson染色觀察氣道上皮膠原沉積面積。5.Image-Pro Plus圖像分析軟件測量氣道相應形態(tài)學改變。6.實時熒光定量PCR檢測脂聯(lián)素受體1mRNA(AdipoR1mRNA)、脂聯(lián)素受體2mRNA(AdipoR2mRNA)、PPARγmRNA表達

3、。7.Western blot法檢測PPARγ、脂聯(lián)素蛋白的表達。
　　結果：1.哮喘組小鼠可見呼吸急促，打噴嚏，大小便失禁，正常對照組小鼠行為無明顯異常。2.血糖測定：正常對照組、哮喘組、吡格列酮組血糖分別為8.27±0.54、8.95±0.74、8.22±0.95，3組小鼠血糖比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。3.HE染色病理改變：顯微鏡下可見正常對照組小鼠氣道上皮無明顯破壞，支氣管內(nèi)未見黏液分泌。哮喘組氣道上皮可見多處斷

4、裂和脫落，氣道上皮細胞腫脹明顯，支氣管內(nèi)可見大量黏液分泌。吡格列酮組可見氣道上皮細胞斷裂和脫落，支氣管內(nèi)可見黏液潴留，程度較哮喘模型組減輕。4.各組小鼠Masson染色改變：正常對照組氣道上皮下見少量膠原沉積，哮喘組氣道上皮下可見明顯膠原沉積，吡格列酮組氣道上皮下可見膠原沉積，沉積面積較哮喘組減少，Image-Pro Plus圖像分析軟件測定，3組氣道上皮下膠原沉積面積在各組中所占比例依次為（8.75±1.25）％、(44.71±6.8

5、8)％、(23.48±2.42)％，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。5.氣道形態(tài)學改變：正常對照組、哮喘組、吡格列酮組氣道壁厚度依次為(15.39±0.83)μm、(32.18±0.76)μm、(23.84±0.91)μm，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01），以上三組平滑肌厚度依次為(3.42±0.27)μm、(11.46±1.86)μm、(7.70±0.16)μm，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01）。6.實時熒光定量PCR檢測：正常對

6、照組、哮喘組、吡格列酮組PPARγmRNA表達量分別為(0.96±0.0260)、(2.12±0.1473)、(4.28±0.1640)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。AdipoR1mRNA在3組中表達量分別為(0.99±0.1250)、(0.44±0.0733)、(1.88±0.0510)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05），AdipoR2mRNA在3組中表達量分別為(1.00±0.1170)、(0.46±0.0733)、(3.13

7、±0.1300)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。7.Wetern-blot法檢測相關指標：3組均可見脂聯(lián)素表達，與正常對照組比較，哮喘組呈弱表達，吡格列酮組中表達明顯增加，3組光密度值分別為(0.25±0.01)、(0.12±0.01)、(0.49±0.03)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。3組均可見PPARγ蛋白表達，與正常對照組比較，哮喘組表達稍有增加，吡格列酮組強表達，3組光密度值分別為(0.11±0.01)、(0.31±