慢性鉛中毒對(duì)大鼠腦組織的毒性作用.pdf

1、本研究從動(dòng)物整體器官組織和細(xì)胞水平上，通過病理學(xué)與生理生化相結(jié)合的方法，較系統(tǒng)、全面地對(duì)鉛致海馬有關(guān)病理和機(jī)理進(jìn)行探討。 從細(xì)胞水平上用MTT法檢測(cè)海馬神經(jīng)細(xì)胞存活率，不同濃度醋酸鉛(低、中和高濃度)分別作用24h后，0D570值降低逐漸明顯，呈現(xiàn)劑量和時(shí)間依賴關(guān)系；培養(yǎng)上清中乳酸脫氫酶釋放明顯增加(p<0.01)，膽堿酯酶活力明顯下降。尼氏體染色，HE染色和Giemsa染色發(fā)現(xiàn)鉛能使海馬神經(jīng)元表面粗糙、胞體變小、突起細(xì)小、回縮

2、，斷裂，甚至減少、出現(xiàn)裸核，細(xì)胞之間網(wǎng)絡(luò)疏松，胞體與胞漿之間界限逐漸模糊不清，且有劑量和時(shí)間依賴關(guān)系。激光掃描共聚焦顯微鏡定量分析海馬神經(jīng)元胞漿中游離Ca2+的平均熒光強(qiáng)度，鉛在一定濃度范圍和作用時(shí)間內(nèi)使海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度明顯升高(p<0.01)，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高可能與鉛致海馬神經(jīng)元損傷和誘導(dǎo)其凋亡有重要關(guān)系。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示各醋酸鉛組作用后細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯升高(p<0.01)，且與染鉛劑量有很好的相關(guān)性。免疫細(xì)胞

3、化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)低、中、高鉛組分別作用3d、6d、9d后，Bcl-2蛋白陽性的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目顯著降低，而Bax蛋白陽性的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目顯著增加；iNOS在隨著鉛濃度的增大，iNOS表達(dá)明顯增加；醋酸鉛可以促進(jìn)大鼠海馬細(xì)胞中P53基因的表達(dá)，并有良好的劑量反應(yīng)關(guān)系。 整體動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，飲用含鉛水0.5 g/L、1.0g/L和2.0 g/L(低、中和高鉛組)暴露1月、3月和6月后，各實(shí)驗(yàn)組大鼠攝食量、飲水量逐漸減少，尤其是高鉛暴露組染毒3月

4、、6月時(shí)，平均總飲水量和平均總攝食量均顯著低于對(duì)照組(p<0.01)。各組血鉛水平均明顯高于對(duì)照組(p<0.01)， 2.0 g/L亞組的血鉛水平均明顯高于組內(nèi)的0.5 g/L亞組(p<0.01)，隨染鉛時(shí)間的延長(zhǎng)、濃度的增加，血鉛水平有所升高，但三組的組間血鉛水平相比均無明顯差異(p>0.05)。各組腦勻漿鉛水平均明顯高于對(duì)照組(p<0.05)。飲用高鉛水1月、3月、和6月后各組腦區(qū)尼氏體均有不同程度的減少，神經(jīng)元固縮，且與染毒時(shí)間和

5、劑量有關(guān)：免疫組織化學(xué)染色圖像分析發(fā)現(xiàn)，海馬區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)陽性神經(jīng)元細(xì)胞均隨染鉛劑量增大而減少，染色強(qiáng)度逐漸降低，平均灰度值逐漸增大；Bax蛋白則與Bcl-2蛋白相反。iNOS在鉛處理組大鼠海馬、皮層的表達(dá)明顯上升，隨染毒劑量增加，iNOS的表達(dá)明顯增加，有良好的劑量-反應(yīng)關(guān)系。大鼠腦組織海馬P53表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)顯著增加，表達(dá)強(qiáng)度有升高趨勢(shì)：鉛誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡與P53的表達(dá)呈正相關(guān)。 綜合上述研究結(jié)果，長(zhǎng)期飲用高鉛水后大