基于分子信標的光致電化學生物傳感方法研究.pdf

1、目前，分析科學工作者為了適應生命科學的發(fā)展要求，已經(jīng)建立了一系列光學或者電化學檢測DNA的方法。本論文將分子信標與光敏反應、電化學反應相結(jié)合，提出了一種新的光致電化學生物傳感新方法；研究了電沉積法固定電化學發(fā)光試劑Ru(bpy)32+于電極表面的可行性和利用該電極制備電化學發(fā)光傳感器的可行性。
　　全文共分四章，主要內(nèi)容如下：
　?。?）緒論部分，對DNA的結(jié)構(gòu)及常見的檢測方法，分子信標的含義及檢測原理進行了闡述，介紹了電化

2、學發(fā)光原理及其應用，Ru(bpy)32+電化學發(fā)光原理。
　　（2）首先對基于分子信標的光致電化學新型DNA傳感器中所必須的單線態(tài)氧電化學捕獲探針進行了選擇研究。研究了一系列活性氧清除劑（蘆丁、多巴胺、腎上腺素、異煙肼、抗壞血酸等）捕獲亞甲基藍光敏產(chǎn)生的單線態(tài)氧前后電化學性質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)蘆丁和多巴胺可以與光敏產(chǎn)生的單線態(tài)氧反應，且在反應之后蘆丁和多巴胺的電化學氧化還原峰電流有明顯的降低。本章中對光敏反應中產(chǎn)生的活性氧的種類進行了判

3、定；對測定條件進行了優(yōu)化，結(jié)果表明當磷酸緩沖溶液的pH=7，蘆丁濃度為1×10-5 mol/L，亞甲基藍濃度為1×10-6 mol/L時，蘆丁捕獲單線態(tài)氧的效果最佳。
　?。?）構(gòu)建了一種基于熒光分子標記的分子信標光致電化學新型DNA傳感器。此方法中首先將亞甲基藍標記的分子信標探針和多巴胺同時固定在金電極表面修飾的金納米粒子上；與目標DNA結(jié)合前，分子信標上的亞甲基藍的熒光被金納米粒子猝滅；與目標DNA結(jié)合后，分子信標打開，亞甲基

4、藍熒光恢復，在光照作用下與溶解氧分子作用產(chǎn)生單線態(tài)氧，單線態(tài)氧與多巴胺反應；以多巴胺的電化學響應信號傳感分子信標探針構(gòu)象變化，從而對溶液中的目標DNA進行檢測。此方法成功用于花椰菜花葉病毒的基因組DNA的檢測中。此外我們還對該傳感器的特異性進行了檢測。
　?。?）介紹了一種操作簡便、容易控制的制備二氧化硅復合膜的方法，及其在電化學發(fā)光傳感器中的應用。采用電沉積的方法制備了殼聚糖-金納米粒子-Ru(bpy)32+-二氧化硅復合膜，采