基于微孔板的化學發(fā)光法檢測孔雀石綠和結晶紫的研究.pdf

1、孔雀石綠和結晶紫是致癌、致畸、致突變的“三致”化合物。盡管大部分國家和地區(qū)包括中國已經(jīng)將其列為水產(chǎn)獸醫(yī)產(chǎn)業(yè)的禁用藥，但是在利益的驅(qū)使下，仍有不法商人在水產(chǎn)品的養(yǎng)殖、運輸和保鮮過程中使用。我國出口的水產(chǎn)品常被檢測出孔雀石綠的殘留，使我國水產(chǎn)品出口產(chǎn)業(yè)受到不小的打擊。同時側面反映出，我國的水土環(huán)境正在或?qū)獾娇兹甘G和結晶紫的嚴重污染。因此，加大孔雀石綠和結晶紫的檢測力度，是我國實現(xiàn)經(jīng)濟可持續(xù)發(fā)展的必然舉措之一。目前常用的孔雀石綠和結晶紫

2、殘留的有效檢測手段有高效液相色譜法、液-質(zhì)聯(lián)用法、酶聯(lián)免疫分析法等，但這些方法樣品預處理復雜，操作繁瑣，材料儀器昂貴，不利于現(xiàn)場檢測。因此，市場上亟待一種快速、靈敏的檢測手段來監(jiān)測水土環(huán)境孔雀石綠或結晶紫的污染。以luminol化學發(fā)光為基礎的高靈敏度分析檢測方法因具有檢測限低、分析速度快、操作簡單、線性范圍長等突出優(yōu)點，近年來吸引了研究人員的廣泛關注。
　　本論文首先研究孔雀石綠和結晶紫對Na2CO3-luminol-H2O2三

3、元體系的化學發(fā)光強度的影響，并設計單因素實驗和正交實驗來對關鍵實驗條件進行優(yōu)化，分別繪制孔雀石綠和結晶紫濃度對Na2CO3-luminol-H2O2三元體系相對化學發(fā)光值的標準曲線，建立基于微孔板的化學發(fā)光檢測法，并對4種加標的環(huán)境水樣進行分析檢測;制備了孔雀石綠和結晶紫的分子印跡聚合物（MG-MIPs，CV-MIPs），并用紅外光譜、掃描電鏡、平衡吸附實驗和Scatchard分析對其進行表征;分別用MG-MIPs和CV-MIPs灌裝成

4、固相萃取小柱，萃取加標土壤樣品中孔雀石綠和結晶紫，使用新建立的化學發(fā)光檢測法對處理后的樣品進行檢測。
　　然后成功建立基于Na2CO3-luminol-H2O2三元體系的微孔板化學發(fā)光檢測孔雀石綠和結晶紫的方法?？兹甘G濃度的對數(shù)值與相對化學發(fā)光值在2～800 ng·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關系，R2=0.9954,檢出限為0.76 ng·mL-1(3σ)，4種加標的環(huán)境水樣的回收率為90.4％～112.1％，相對標準偏差為2.

5、7％～6.1％。結晶紫濃度的對數(shù)值與相對化學發(fā)光值在2～800 ng· mL-1范圍內(nèi)呈良好的現(xiàn)象關系，R2=0.9939,檢出限為0.59 ng·mL-1(3σ)，4種加標的環(huán)境水樣的回收率為88.8％～106.2％，相對標準偏差為3.5％～10.9％。對于3種加標的土壤樣品中孔雀石綠和結晶紫的回收率，與未用分子印跡固相萃取的實驗結果對比，孔雀石綠的回收率從43.1％～57.9％提高至71.5％～83.3％，結晶紫的回收率從44.1％

6、～62.5％提高至62.1％～84.0％，經(jīng)過分子印跡固相萃取顯著提高了加標樣品的回收率。
　　最后以孔雀石綠和結晶紫對Na2CO3-luminol-H2O2體系的化學發(fā)光均有顯著抑制作用為基礎，分別建立了針對孔雀石綠和結晶紫的化學發(fā)光檢測方法，配合96孔化學發(fā)光微孔板和酶標儀輔助進樣模塊的使用，實現(xiàn)了單個待測樣品的平行檢測、多個樣品同時檢測以及標準溶液的同步檢測，提高自動化程度，簡化檢測流程，為實現(xiàn)實時監(jiān)測及環(huán)境預警監(jiān)測奠定基礎