MdSBP4-20基因在不同抗性蘋果砧木‘青砧1號’和‘M26’中非生物脅迫功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、抗非生物脅迫是蘋果砧木育種的重要目標，SBP轉錄因子與植物非生物脅迫有關系。為探討 SBP轉錄因子在蘋果砧木非生物脅迫中的功能，本研究以不同抗性蘋果砧木‘青砧1號’（（平邑甜茶（Malus hupehensis Rehd.）×柱型蘋果株系CO（Malus domestica Borkh.）和‘M26’為試材，采用同源克隆法分別克隆得到兩個SBP基因的cDNA的全長序列，因其與蘋果數(shù)據(jù)庫中序列一致，故命名為MdSBP4和MdSBP20；利

2、用生物信息學軟件對已獲得的兩個基因進行基本的生物信息學分析；應用實時熒光定量 PCR技術分析MdSBP4基因和MdSBP20基因在低溫、干旱、鹽堿脅迫處理（6h、12h、24h、48h、96h、120h、168h）中的表達量；構建了過量表達載體pCAMBIA2300-MdSBP4/20和空載體pCAMBIA2300，利用花序侵染法轉化‘擬南芥’，利用PCR檢測驗證MdSBP4基因和MdSBP20基因在非生物脅迫中的功能。研究結果如下：<

3、br>　　生物信息學分析表明：MdSBP4基因序列全長1473bp，包含完整開放閱讀框1473bp，編碼491個氨基酸，預測其蛋白質分子量為53472.90Daltons，等電點為7.771。MdSBP20基因序列全長1362bp，包含完整開放閱讀框1362bp，編碼454個氨基酸，預測其蛋白質分子量為49372.32Daltons，等電點為8.597。二者均具有明顯的SBP結構域，包含兩個鋅指結構Zn-1、Zn-2和雙向核定位信號區(qū)N

4、LS。
　　系統(tǒng)進化樹分析表明：蘋果MdSBP4與MdSBP6遺傳關系最近，蘋果MdSBP20與白梨PbSBP6遺傳關系最近。表明MdSBP4和MdSBP20是蘋果SBP家族基因中的成員，且SBP結構域在植物進化過程中保守程度較高。
　　實時熒光定量PCR技術檢測表明：MdSBP4基因和MdSBP20基因均參與并調節(jié)‘青砧1號’和‘M26’的抗寒、抗旱、抗鹽堿反應；MdSBP4基因和MdSBP20基因的表達量在抗旱性強和抗鹽

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