電針干預胰島素抵抗狀態(tài)下AD模型大鼠的實驗研究.pdf

1、本研究是以PI3K胰島素信號轉(zhuǎn)導途徑為基礎，設計實驗觀察針刺對胰島素抵抗(IR)的干預作用;以自發(fā)性胰島素抵抗模型-OLETF大鼠為動物模型，用RT-PCR、Western blotting等檢測方法，檢測指標空腹血糖(FPG)、血漿胰島素(FINS)、C肽、腦脊液胰島素，以觀察針刺干預對OLETF大鼠海馬中IRS-2、PI3K、Akt、GSK的mRNA和蛋白表達的改變，以及大鼠海馬中Aβ的沉淀以及Tau蛋白mRNA改變的情況，由分子生

2、物學水平探討針刺改善胰島素抵抗的機制原理。
　　目的:
　　以自發(fā)性胰島素抵抗模型OLETF大鼠為研究對象，在此動物模型基礎上建立AD模型，觀察針刺（穴選百會、腎俞、內(nèi)關、足三里、三陰交）對AD模型大鼠中樞胰島素抵抗狀態(tài)的影響，初步探討針刺對AD模型大鼠中樞胰島素信號轉(zhuǎn)導PI3K通路各組成蛋白（IRS-2，PI3K，Akt，IDE，GSK-3α/β，Aβ，Tau）表達的作用，從中樞胰島素信號轉(zhuǎn)導通路的角度闡釋針灸治療AD的機

3、理。
　　方法:
　　選用自發(fā)性胰島素抵抗OLETF大鼠和同品系LETO大鼠，以OLETF大鼠為基礎建立AD模型。造模方法采用腹腔注射D-半乳糖和灌胃AlCl3溶液的方法建立AD模型。D-半乳糖采用60mg·kg-1·d-1，AlCl3采用50mg·kg-1·day-1，按照10ml/kg溶液體積配置溶液。連續(xù)造模60天，造模完成后用Morris水迷宮進行行為學測試，剔除不合格模型。以LETO大鼠為正常組，將造模成功的OLE

4、TF大鼠隨機分為模型組和針刺組，每組8只。針刺組給予針刺干預，穴選百會、腎俞（雙）、內(nèi)關（雙）、足三里（雙）、三陰交（雙），連續(xù)治療三周。治療結束后，檢測所有大鼠空腹血糖(FPG)、血漿胰島素(FINS)、血清C-肽(C-P)，和海馬中的IRS-2、PI3K-p85α、Akt2、IDE、GSK-3α/β，以及海馬中的Aβ含量、tau蛋白。
　　結果:
　　針刺干預的EA-AD-OLETF組大鼠的FPG、FINS、C-P較模型

5、AD-OLETF組顯著降低(P＜0.01)。
　　Morris水迷宮實驗中，模型AD-OLETF組較正常LETO組穿越原平臺象限時間占總時間百分比減小(P＜0.01);針刺EA-AD-OLETF組較模型組則顯增大(P＜0.05)。
　　海馬中的IRS-2、PI3K-p85α、Akt2、IDE、GSK-3α/β針刺作用后，其mRNA變化不明顯，但是其相關的p-IRS-2、IDE、p-GSK-3β蛋白在干預后有了明顯的提升(P＜

6、0.01，P＜0.05)，p-PI3K-p85α、p-Akt2蛋白較干預前有所降低(P＜0.05)。
　　在針刺干預后，針刺組EA-AD-OLETF組大鼠海馬中Aβ沉淀細胞的個數(shù)較AD-OLETF組明顯減少(P＜0.05)。針刺干預后的EA-AD-OLETF大鼠海馬Tau mRNA表達比AD-OLETF升高(P＜0.05)。
　　結論:
　　從針刺干預胰島素抵抗角度治療AD，可以明顯改善模型大鼠胰島素抵抗狀態(tài)，并且改善