王漿主蛋白MRJPs對(duì)果蠅的抗衰老功能及分子機(jī)理研究.pdf

1、蜂王漿(RJ)是由5～15d工蜂頭部營(yíng)養(yǎng)腺(舌腺和鄂腺)分泌，專供蜂王和3d的幼蟲食用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。蜂王漿的化學(xué)成分極為復(fù)雜，其中蛋白質(zhì)是主要營(yíng)養(yǎng)和功能成分，其含量約占王漿干物質(zhì)的50％。王漿蛋白分為水溶性及非水溶性兩大類，其中可溶性蛋白約占王漿總蛋白的82～90%，被稱為王漿主蛋白(MRJPs)。
　　 本實(shí)驗(yàn)首先從液料比、離子強(qiáng)度、pH和抽提時(shí)間4個(gè)單因素出發(fā)，結(jié)合蛋白穩(wěn)定性、生產(chǎn)成本等因素，進(jìn)行了L9(34)正交實(shí)驗(yàn)，作MR

2、JPs提取工藝優(yōu)化。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，對(duì)MRJPs提取率影響因素從高到低依次是：離子強(qiáng)度、pH、抽提時(shí)間和液料比，但是影響效果均不顯著(p>0.05)。最佳提取條件為：液料比8:1(V/W)，離子強(qiáng)度0.5，抽提pH8.0，抽提時(shí)間8h。在最佳提取工藝下，MRJPs提取率為81.14%。對(duì)提取MRJPs后的副產(chǎn)物回收凍干，測(cè)得10-羥基-2-葵烯酸(10-HDA)和總糖回收利用率分別為2.91%、1.26%。經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS

3、-PAGE)檢測(cè)，所提取的MRJPs蛋白分子量與分布與報(bào)道相符。
　　 其次，用添加1.25%、2.50%、5.00% MRJPs的飼料為實(shí)驗(yàn)組，以基礎(chǔ)飼料和添加1.25%酪蛋白的飼料為陰性和陽(yáng)性對(duì)照，分別培養(yǎng)Canton-S野生型果蠅。結(jié)果顯示，與陰性和陽(yáng)性對(duì)照相比，5.00% MRJPs干預(yù)使雄性果蠅的平均壽命分別延長(zhǎng)11.93%和7.78%，2.50% MRJPs干預(yù)使雌性果蠅的平均壽命分別延長(zhǎng)8.98%和7.40%(p<

4、0.05)，表明MRJPs能顯著延長(zhǎng)雌雄果蠅的平均壽命。
　　 進(jìn)一步作攝食量和繁殖力比較，發(fā)現(xiàn)MRJPs能顯著提高果蠅的攝食量和繁殖力(p<0.05)，顯示這兩種因素變化對(duì)果蠅的衰老無負(fù)面影響。然后測(cè)定了7d和21 d各處理雌雄果蠅的銅鋅超氧化物歧化酶[SOD(Cu，Zn)]活力和丙二醛(MDA)含量變化，結(jié)果顯示MRJPs可提高雌雄果蠅的SOD(Cu，Zn)活力，降低雌雄果蠅體內(nèi)的MDA含量(p<0.05)。