檸檬烯自微乳給藥系統(tǒng)構(gòu)建、體內(nèi)外評價及其固化研究.pdf

1、檸檬烯(limonene，LIM)主要是由蕓香科植物甜橙、葡萄柚和檸檬等的濕皮經(jīng)冷榨精制而成的具有令人愉快香氣的化合物，其廣泛存在于各種辛香料揮發(fā)油中。LIM藥理作用廣泛，目前在臨床上LIM主要用于利膽、溶石、促進(jìn)消化液分泌和抑制腫瘤活性等。因其獨特的檸檬香氣和廣泛的藥理活性，近年來在香料香精、食品工業(yè)和醫(yī)藥領(lǐng)域都顯示出了巨大的優(yōu)勢和開發(fā)潛力。然而，LIM的低水溶性、強揮發(fā)性和極差的生物利用度，使其臨床上的應(yīng)用受限。本課題以自微乳化給藥

2、系統(tǒng)（self-microemulsifying drug delivery system，SMEDDS）為給藥載體，增加水難溶性藥物L(fēng)IM的溶解度，促進(jìn)其體內(nèi)外釋放及提高其生物利用度，并在LIM自微乳(L-SMEDDS)的基礎(chǔ)上制備LIM固體自微乳(L-S-SMEDDS)速釋微丸，將液體制劑固體化以達(dá)到提高液體制劑的穩(wěn)定性和便于攜帶等目的，全文主要分為以下五個部分。
　　第一部分 綜述
　　本部分主要對LIM的基本理化性質(zhì)

3、、藥理活性及制劑的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，并闡述了自微乳化制劑應(yīng)用的概況，為本課題后續(xù)開展的制劑學(xué)研究奠定理論基礎(chǔ)。
　　第二部分 處方前研究
　　本部分建立了高效液相色譜(HPLC)法，對L-SMEDDS中LIM的含量進(jìn)行檢測及對所構(gòu)建的分析方法進(jìn)行驗證。同時，本部分以LIM原料藥為研究對象，測定了LIM在不同pH（1.2和6.8）介質(zhì)及雙蒸水中的平衡溶解度及油水分配系數(shù)。結(jié)果顯示在pH6.8時所測得的溶解度最大，但其值僅為0

4、.051 mg·g-1，表明LIM幾乎不溶于水。搖瓶法測定不同pH（1.2和6.8）介質(zhì)及雙蒸水中的油水分配系數(shù)分別為2.29、2.03和2.08，表明LIM疏水性較強。
　　第三部分 LIM自微乳的制備及體外表征
　　本部分首先通過測定LIM在各個油相、乳化劑及助乳化劑中的溶解度和對各個油相、乳化劑及助乳化劑之間的相容性進(jìn)行考察，初步篩選了合適的SMEDDS體系的組成成分。隨后，進(jìn)一步通過對偽三相圖的構(gòu)建，確定了L-SME

5、DDS的最佳處方為m(LIM)∶m(ethyl oleate)∶m(CremophorEL35)∶m(isopropanol)=2∶1∶2∶2。
　　本部分對最佳處方所制備的L-SMEDDS進(jìn)行物理化學(xué)表征。首先，通過染色法鑒別L-SMEDDS所形成微乳的類型;隨后，采用粒度分析儀分別測定其粒徑分布及Zeta電位，且通過透射電鏡(TEM)觀察其微觀形態(tài);最后，本部分考察了L-SMEDDS在不同的釋放介質(zhì)中的體外釋藥情況，并初步評價

6、了該制劑的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示L-SMEDDS所形成微乳為O/W型體系，平均粒徑為104.5nm，Zeta電位值為-5.45 mV;10 min內(nèi)在不同釋放介質(zhì)中的累積釋放率可達(dá)86％以上，說明SMEDDS起到了顯著改善LIM體外釋放的作用;穩(wěn)定性實驗表明本實驗制備的L-SMEDDS在較低溫度下，30天內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。
　　第四部分 LIM自微乳大鼠體內(nèi)藥動學(xué)及小鼠體內(nèi)分布特性的研究
　　本部分以SD大鼠及KM小鼠為動物模型

7、，建立了LIM體內(nèi)分析方法。以自制L-SMEDDS為受試制劑，以LIM原料藥為對照制劑，對相關(guān)藥物動力學(xué)參數(shù)以及體內(nèi)組織分布特性進(jìn)行了考察。藥動學(xué)結(jié)果顯示:LIM原料藥、L-SMEDDS的Cmax分別為330.4±19.7 ng·mL-1和985.0±28.5 ng·mL-1，說明SMEDDS促進(jìn)了LIM的體內(nèi)吸收。LIM原料藥與L-SMEDDS的tmax均為6h，且兩者的t1/2和MRT相差不大，AUC0-24分別為2335.9±23

8、7.7 h·ng·mL-1和8678.7±473.6h·ng·mL-1，L-SMEDDS相較于LIM原料藥的相對口服生物利用度為371.5％，說明本文所制備的L-SMEDDS顯著提高了LIM的生物利用度。小鼠經(jīng)口服L-SMEDDS后0.5、1、2、4、6和8h的體內(nèi)分布實驗結(jié)果表明，所制備的L-SMEDDS趨向于肝、脾、腎、腦部聚集并存在明顯的二次吸收現(xiàn)象，且其在小鼠組織及血漿中的分布總濃度明顯高于LIM原料藥。
　　第五部分 L

9、IM固體自微乳微丸的制備及體外表征
　　本部分利用固體吸附技術(shù)與擠出滾圓技術(shù)相結(jié)合制得了L-S-SMEDDS速釋微丸。首先，通過考察不同吸附材料對L-SMEDDS濃縮液的吸附能力，篩選得到最佳的吸附載體材料為微晶纖維素(MCC)，并對載藥量進(jìn)行了考察，確定了制備L-S-SMEDDS速釋微丸的MCC與L-SMEDDS質(zhì)量比為55∶45。其次，采用正交設(shè)計對擠出滾圓的各個工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，篩選得到了最優(yōu)的擠出速度、滾圓速度和滾圓時間