黃曲霉拮抗菌株的篩選、鑒定及其活性物質(zhì)的初步研究.pdf

1、食品安全問題倍受世界各國的高度重視，真菌產(chǎn)生的毒素是造成食品污染的重要來源。黃曲霉(Aspergillus flavus)是污染花生等農(nóng)產(chǎn)品的主要菌種，黃曲霉孢子能侵染植物及其產(chǎn)品，從而污染到各種食品和飼料，對人類和禽類健康造成很大的影響。黃曲霉產(chǎn)生的黃曲霉毒素是一類毒性極強(qiáng)的物質(zhì)，廣泛地分布在發(fā)霉糧食及制品中，特別是花生、花生油、玉米及其制品;乳制品和飼料中也含有較多的黃曲霉毒素。黃曲霉毒素是所有真菌毒素中毒性最強(qiáng)的，具有致突變、致癌

2、和致畸的作用。然而，目前的黃曲霉毒素污染控制方法都存在各種局限性。黃曲霉毒素的污染嚴(yán)重威脅到人類健康和經(jīng)濟(jì)。
　　目前對黃曲霉及其毒素的防治，國內(nèi)外的研究主要集中在利用微生物的次生代謝產(chǎn)物和植物提取物來獲得具有抗菌或降解毒素特性的物質(zhì)。本研究采用稀釋分離法從土壤中篩選出17株具有黃曲霉拮抗活性的菌株，利用拮抗菌的發(fā)酵產(chǎn)物來達(dá)到控制和防治黃曲霉，同時考察了17株菌對黃曲霉毒素的降解效果。實驗結(jié)果如下:(1)根據(jù)菌株的形態(tài)學(xué)、生理生化

3、特性及16S rDNA序列分析等對拮抗菌進(jìn)行了初步鑒定，采用分子生物學(xué)軟件進(jìn)行了多樣性分析，結(jié)果顯示，17株菌分屬8個類群:Y-21-1-2、Y-32-1-1、Y-32-1-2屬于枯草芽孢桿菌，Y-1-4屬于耐鹽短桿菌，Y-17-3屬于空氣芽孢桿菌，Y-8-3、Y-18-2屬于高地芽孢桿菌，Y-41-2、Y-43-2、Y-2-3和Y-17-1屬于蘇云金芽孢桿菌，Y-9-1屬于巨大芽孢桿菌，Y-40-1屬于韓國芽孢八疊菌，Y-38-3-1

4、、Y-38-3-2、Y-27-2、Y-1-1屬于紡錘形賴氨酸芽孢桿菌。(2)選取抑菌活性最強(qiáng)的菌株Y-17-3作進(jìn)一步研究，當(dāng)發(fā)酵液中加入硫酸銨的飽和度達(dá)到70％時，沉淀物抑菌活性最強(qiáng)，該物質(zhì)對酸堿敏感，水浴溫度超過50℃時，其抑菌活性消失。(3)以香豆素為惟一碳源進(jìn)行黃曲霉毒素降解菌株的篩選，其中Y-21-1-2和Y-17-3對香豆素的降解效率最高;以黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)品為對照，考察了兩株菌對黃曲霉毒素的降解能力，結(jié)果顯示菌株Y-21-1