油茶粕多肽的生物活性及其安全性評(píng)價(jià).pdf

1、本文以油茶粕蛋白為原料，研究了酶解所得油茶粕多肽的抗氧化活性、抑菌活性及安全性，主要試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 本研究以抗亞油酸過(guò)氧化能力為指標(biāo)，對(duì)Alcalase、Papain、Trypsin、Flavorzyme、Neutrase等5種蛋白酶進(jìn)行了篩選，并運(yùn)用軟件Design-Expert7.1Trial，確定了酶解油茶粕蛋白制備抗氧化肽的最佳工藝參數(shù)。結(jié)果表明：采用Alcalase酶解油茶粕蛋白明顯優(yōu)于其它4種蛋白酶，其酶解最佳

2、條件為pH值8.3，底物濃度16.8 mg/g，反應(yīng)溫度48.8℃，反應(yīng)時(shí)間6.5 h。此時(shí)所得油茶粕多肽對(duì)亞油酸過(guò)氧化抑制率為60.83％±0.57％(n=3)，與預(yù)測(cè)值61.86％非常相近，說(shuō)明采用響應(yīng)面法優(yōu)化得到的酶解參數(shù)是可靠的，具有可行性。
　　 通過(guò)測(cè)定所得油茶粕多肽的還原能力、清除羥自由基(OH·)能力、對(duì)Fe2+螯合能力及清除DPPH自由基能力，進(jìn)一步研究了油茶粕多肽的體外抗氧化作用。結(jié)果表明：油茶粕多肽具有較強(qiáng)

3、清除羥自由基(OH·)、DPPH自由基的能力，其IC50值分別為0.181g/L和0.367g/L，分別是維生素C的IC50值的1.56倍和52.4倍。油茶粕多肽螯合Fe2+的IC50值約為EDTA的3890倍。通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分析了油茶粕多肽對(duì)小鼠抗氧化功能的調(diào)節(jié)作用。灌胃四氯化碳使小鼠肝中毒，1 h后分別灌胃不同量的油茶粕多肽溶液，24 h后測(cè)定小鼠肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的活性以及丙二醛(MD

4、A)的含量，結(jié)果表明油茶粕多肽能顯著降低小鼠肝臟中MDA的含量，恢復(fù)SOD及GSH-PX的活力，表現(xiàn)出很強(qiáng)的體內(nèi)抗氧化活性。
　　 以油茶粕蛋白為原料，采用Pepsin蛋白酶水解，并對(duì)酶解工藝進(jìn)行優(yōu)化。以大腸桿菌的抑菌率為指標(biāo)，采用響應(yīng)曲面分析法，設(shè)計(jì)了4因素5水平實(shí)驗(yàn)，確定了酶解油茶粕蛋白獲取油茶粕抗菌肽的最佳工藝條件，酶添加量為0.22％，pH值為2.36，反應(yīng)溫度36.82℃，反應(yīng)時(shí)間為5.99 h。在此條件下，獲取的油茶

5、粕多肽對(duì)大腸桿菌的抑制率達(dá)到67.08％±0.22％(n=3)，與預(yù)測(cè)值67.32％非常相近。
　　 按照食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法對(duì)油茶粕多肽進(jìn)行急性毒理學(xué)試驗(yàn)、遺傳毒性試驗(yàn)和30天喂養(yǎng)試驗(yàn)。采用一次最大限量法(攝入量為20.00g/kg·kw)，進(jìn)行油茶粕多肽對(duì)大、小鼠急性毒性試驗(yàn)，無(wú)死亡；小鼠精子畸變?cè)囼?yàn)、Ames試驗(yàn)和骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)結(jié)果均為陰性；30天喂養(yǎng)試驗(yàn)中各項(xiàng)指標(biāo)均未見異常。研究結(jié)果初步表明油茶粕多肽