水產品中酒石酸銻鉀代謝產物檢測技術及其在鯽魚體內代謝轉化規(guī)律的研究.pdf

1、酒石酸銻鉀（PAT）在我國水產養(yǎng)殖中曾用于寄生蟲疾病的防治。由于其代謝產物-銻具有很強的毒性，農業(yè)部193號公告以及235號公告已將其歸為禁用漁藥之列。但由于缺乏檢測標準，不能排除部分漁民會繼續(xù)使用，并且銻毒性大、難代謝，對水產品質量安全有極大威脅。PAT進入生物體后立即分解為銻、酒石酸、以及鉀離子。由于鉀離子在生物體中屬于常量元素，不能作為檢測酒石酸銻鉀殘留指標，而酒石酸和銻在水產品本底中含量低，是酒石酸銻鉀的特征代謝產物，因此，本文

2、以檢測二者殘留判定是否使用過PAT。同時，由于PAT中的三價銻進入水產品后形態(tài)會發(fā)生變化，且毒性發(fā)生變化，因此有必要建立水產品中不同銻形態(tài)分析檢測方法。本文通過研究建立了水產品中總銻、無機銻、無機銻中的三價銻、無機銻中的Sb(Ⅴ)以及酒石酸的檢測方法；同時，對鯽魚進行PAT藥浴試驗，分析了鯽魚各組織中總銻、不同形態(tài)銻、酒石酸的含量變化，揭示了鯽魚體內PAT富集代謝規(guī)律以及銻形態(tài)和價態(tài)轉化規(guī)律，并對水產品中PAT殘留檢測提出了參考意見。論

3、文研究內容主要有以下幾方面：
　　1.建立了水產品中PAT代謝產物-銻的順序注射-氫化物發(fā)生原子熒光（HG-AFS）檢測方法。首先利用微波消解，濕法消解，微波消解結合濕法消解的前處理方法展開對水產品中總銻測定研究，同時對石墨爐-HRCS AAS、氫火焰-HRCS AAS以及順序注射-HG-AFS三種檢測技術測定總銻進行了比較，選擇了微波消解結合濕法消解順序注射-HG-AFS法檢測水產品中PAT代謝產物-總銻。在該方法下，銻檢測限為

4、0.027ng/mL。空白基質加標水平0.125mg/Kg、0.500mg/Kg下的平均回收率為95.97~102.09％，RSD＜6%。
　　2.建立了順序注射-HG-AFS檢測水產品中無機銻及其價態(tài)的方法。樣品經4mol/L鹽酸溶液超聲浸提后加入一定量掩蔽劑、還原劑以及消泡劑在既定HG-AFS條件下測定無機銻含量。另一份相同樣品中加入混合溶液（0.5mol/L硫酸混合0.5mol/L鹽酸混合0.1% NaF）浸提后加入一定量掩

5、蔽劑及消泡劑并調節(jié)樣液鹽酸濃度，在既定HG-AFS條件下測定Sb(Ⅲ)含量。無機銻含量減去Sb(Ⅲ)含量為Sb(Ⅴ)含量。在該方法下無機銻在0.5~40 ng/mL濃度范圍內線性良好，線性相關系數為0.9991。以3SD/k計算，檢出限為0.450μg/kg。6次平行測定RSD為2.31%，基質加標回收率為90.97~100.10%。Sb(Ⅲ)在0.5~40ng/mL濃度范圍內線性良好，線性相關系數為0.9996，以3SD/k計算，檢出

6、限為0.400μg/kg，6次平行測定RSD為3.51%，基質加標回收率范圍為84.54-89.05%。
　　3.建立了固相萃取-抑制電導離子色譜法測定水產品中PAT代謝產物-酒石酸的方法。在該方法下，酒石酸在80.00~1000.00ng/mL線性范圍內的線性相關系數為0.9989。以3倍信噪比計算得酒石酸檢出限為50μg/L，基質加標回收率介于84.39%~87.23%，RSD<6.53%。
　　4.研究了PAT在鯽魚中

7、的代謝規(guī)律以及銻形態(tài)變化規(guī)律。首先通過預實驗確定PAT檢測和代謝規(guī)律研究應以銻為指標；然后分析了兩種PAT藥浴劑量藥浴24h過程中，鯽魚各組織中總銻、無機銻、Sb(Ⅲ)以及Sb(Ⅴ)的分布和含量變化。結果表明：PAT中Sb(Ⅲ)進入機體后主要以無機銻形式存在，無機銻主要以Sb(Ⅲ)存在，肝臟是銻主要的靶器官；銻在鯽魚中分布為肝胰腺＞鰓＞血液＞肌肉；Sb(Ⅲ)主要在肝臟和血液中轉化為Sb(Ⅴ)；鯽魚各個組織中銻的富集量對PAT藥浴染毒劑量

8、幾乎不呈現劑量-反應關系，且各組織對銻的富集存在飽和現象。在80mg/L酒石酸銻鉀藥浴后的120d代謝過程中，鯽魚各組織中的銻殘留量及其變化表明：鯽魚四個組織中總銻呈現下降的趨勢，并且前8d代謝相對較快，8d后代謝相對較慢；四個組織對銻的代謝速度不相同，按其速率大小為肝胰腺＞鰓＞血液＞肌肉，可見對銻富集力度越大的組織，其銻代謝速度也越快。代謝120d后，鰓、血液、肌肉中總銻殘留量與背景值相差不大，但肝胰腺中總銻殘留量仍為背景值的8倍左右