谷物中黃曲霉毒素B1的間接競賽爭化學發(fā)光酶免疫分析方法的研究.pdf

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解直昌太堂有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國

2、家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名(手寫)別潞簽字日期：∥歸6月￡‘日導師簽名(手寫)：簽字日期：緲“訛仍1年7月。／日鈔

3、l掃摘要mllllllIlllllll|洲I|1lIIIIllmlllllⅧY1942873摘要黃曲霉毒素B，(，彳以a芒似勘局，AFB。)主要是由黃曲霉(彳印哪，』J姻nayU曲、齋_塋妊霉(ASpergnIuSparaSiticu曲瓤集峰啦霉LASpergiiiUS力耐曬)產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，在花生、小麥、棉籽、玉米和稻米等農(nóng)作物中廣泛存在。AFB。是目前最強的一種化學致癌誘變劑，毒性和致癌性極強，可導致一動物的胃癌、肝癌、腎癌等，

4、還可以通過食物鏈在生物體之間轉移對人和畜的健康造成威脅。許多國家已規(guī)定了其在各類糧食、食品和詞料中的限量標準，因此，研究準確、靈敏、快速的AFB。檢測方法具有重要的現(xiàn)實意義。本研究建立了間接競爭化學發(fā)光酶免疫法(ChemilumiIleScenceenzvmeimmunoassay，CLEIA)檢測食品中的黃曲霉毒素B。，主要研究內(nèi)容如下：1分析了抗原包被濃度、封閉條件、抗體濃度以及反應時間等因素對于競爭反應體系的影響，優(yōu)化后各項指標為

5、AFBlBSA抗原包被濃度15u臥nL、4℃包被12h15h；5％脫脂奶、37℃封閉lh：抗AFBl單抗稀釋倍數(shù)l：150000；酶標二抗稀釋度1：2000；競爭反應時間45min。2建立的間接競爭CLEIA方法的線性范圍在1563p∥mL一50000p臥nL之間，線性回歸方程為y=23264x43206，《=09924；檢出限達到867pg／mL，IC50為5496pg／rrlL，批內(nèi)和批間平均變異系數(shù)分別為403％和697％；平均添

6、加回收率為9272％，平均變異系數(shù)為868％。3分別采用間接競爭AFBlCLEIA方法和市售AFBlELISA定量檢測盒測定32個樣品(小麥樣5個、大米樣8個、玉米樣8個，花生11個)，其中28個樣品被AFBl污染，AFBl含量為132ng／I(g3626ng／l(g，兩種方法的結果無顯著性差異P00l，R2=09954，顯示出兩種方法的檢測結果無顯著性差異。該方法比市售的AFBlELISA試劑盒的靈敏度提高了576倍。關鍵詞：黃曲霉毒