高山被孢霉產(chǎn)花生四烯酸的發(fā)酵工藝研究.pdf

1、花生四烯酸(ARA)屬于ω-6系列多不飽和脂肪酸,因具有促進嬰幼兒腦部發(fā)育、提高機體免疫力等多種重要的生理功能而被廣泛應用于醫(yī)藥、食品等各種領(lǐng)域。傳統(tǒng)的ARA主要來源于動物油等,難以滿足市場需求,而利用微生物產(chǎn)ARA具有不受產(chǎn)地、原料、條件等限制的優(yōu)點,成為當前研究的熱點之一。
　　 本文首先對目前用來生產(chǎn)ARA最常用的微生物高山被孢霉(Mortierellaalpina,M.alpina)的培養(yǎng)條件進行了研究,通過搖瓶實驗考察

2、了碳源、碳氮比、初始pH值、接種量和微量元素等對ARA的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基中使用葡萄糖為碳源,碳氮比維持在40∶1至50∶1之間,初始pH6,接種量10％,添加維生素B1100 mg/L維生素B120.5 mg/L、生物素0.5 mg/L、泛酸鈣120 mg/L和谷氨酸1 g/L是較優(yōu)配方(優(yōu)化培養(yǎng)基A)。實驗并且對比了使用單一氮源及混合氮源對M.alpina發(fā)酵產(chǎn)ARA的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用混合氮源更有利于M.alpina發(fā)酵產(chǎn)AR

3、A,混合氮源得到的ARA產(chǎn)量是使用單一氮源的2倍,且其含量占總油脂的44.5％,在此基礎(chǔ)上獲得優(yōu)化培養(yǎng)基B。
　　 其次,針對M.alpina在實驗保存過程中易發(fā)生退化、老化,導致其耗糖能力降低,直接影響到菌體對營養(yǎng)的攝入,從而導致菌體生長緩慢,油脂積累受阻等問題,對M.alpina進行了高糖馴化研究,先用濃度梯度的PDA培養(yǎng)基馴化菌種,再用馴化后耐受10％高糖PDA平板的菌種進行液體培養(yǎng)基逐級馴化。結(jié)果表明,通過固體培養(yǎng)基及液