SH2-B在結(jié)腸癌中的表達(dá)及作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的演變規(guī)律以及在結(jié)腸癌中異常表達(dá)，明確在腫瘤細(xì)胞中SH2-B的過表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞異常增殖從而參與細(xì)胞癌變的作用機(jī)制。 方法：用免疫組織化學(xué)方法檢測29例結(jié)腸癌組織、27例結(jié)腸腺瘤組織、29例結(jié)腸息肉組織、38例鼻咽癌組織中的SH2-B的表達(dá)，獲得SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的表達(dá)規(guī)律。用LipofecTAMINE2000將pcDNA3.1-SH2-B質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HEK293細(xì)胞，用Western-bl

2、otting分析轉(zhuǎn)染SH2-B基因后SH2-B的表達(dá)，MTT法分析SH2-B對細(xì)胞增殖的影響，明確SH2-B通過增強(qiáng)細(xì)胞增殖而促進(jìn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展。 結(jié)果：①免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果顯示，在顯微鏡下SH2-B在結(jié)腸息肉組織、結(jié)腸腺瘤組織、結(jié)腸癌組織、鼻咽癌組織中的表達(dá)呈漿-核型，以胞漿為主。結(jié)果顯示：結(jié)腸息肉、結(jié)腸腺瘤、結(jié)腸癌患者SH2-B陽性率為分別為31％（9/29）、52％（14/27）、93％（27/29），鼻咽癌患者SH2-

3、B陽性率為87％（33/38）。結(jié)腸癌組織中SH2-B的陽性細(xì)胞表達(dá)率（0.64±0.26）明顯高于結(jié)腸腺瘤組織（0.26±0.27）和結(jié)腸息肉組織（0.12±0.21）（P<0.001），結(jié)腸腺瘤組織中SH2-B陽性細(xì)胞表達(dá)率明顯高于結(jié)腸息肉組織（P<0.05），結(jié)腸癌組織中SH2-B陽性細(xì)胞表達(dá)率（0.64±0.26）略高于鼻咽癌組織（0.49±0.28，p<0.05）。SH2-B表達(dá)強(qiáng)度計分，結(jié)腸癌細(xì)胞（2.76±1.18）明顯高

4、于腺瘤細(xì)胞（0.77±0.85）和結(jié)腸息肉細(xì)胞（0.72±1.16，p<0.0001），腺瘤細(xì)胞與息肉細(xì)胞間無明顯差異（P>0.05）；結(jié)腸癌細(xì)胞（2.76±1.18）與鼻咽癌細(xì)胞（3.03±1.30）之間無顯著性差異（P>0.05），提示SH2-B在結(jié)腸癌變中可能具有重要作用。②細(xì)胞增殖實驗中，將pcDNA3.1-SH2-B質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞，Western-blotting檢測SH2-B表達(dá)，結(jié)果表明：pcDNA3.1-

5、SH2-B在HEK293中表達(dá)明顯增高。MTT法分析細(xì)胞增殖結(jié)果，轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-SH2-B后細(xì)胞增殖顯著強(qiáng)（P<0.05）。結(jié)果提示，SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的高表達(dá)可能促進(jìn)結(jié)腸上皮細(xì)胞異常增殖。 結(jié)論：⑴結(jié)腸癌變是一個多因素作用、多基因參與、多階段發(fā)展的復(fù)雜過程。SH2-B在結(jié)腸息肉、結(jié)腸腺瘤和結(jié)腸癌組織中表達(dá)逐步增強(qiáng)，推斷SH2-B異?；罨赡苁墙Y(jié)腸癌變的早期事件，可能在結(jié)腸癌變早期發(fā)揮重要作用。⑵SH2-B促進(jìn)細(xì)