中藥肉桂提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究.pdf

1、本課題在大量查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，選擇我國(guó)的優(yōu)勢(shì)資源肉桂作為研究對(duì)象，研究其對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用，以期尋找治療Ⅱ型糖尿病的藥物的新途徑。本課題初步完成了肉桂水溶性提取物，有機(jī)溶劑提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究，并通過(guò)超臨界二氧化碳提取和超臨界二氧化碳反溶劑沉析的聯(lián)合工藝制得了肉桂提取物超細(xì)顆粒。 通過(guò)高壓酸水煎煮獲得了水溶性的肉桂提取物，該提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶有較強(qiáng)的抑制活性，其對(duì)α-葡萄糖苷酶的半抑制濃度IC5

2、0為15.5mg/L。定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示該提取物的主要成分為水溶性的多酚，皂甙和少量的鞣質(zhì)和生物堿。采用不同極性的溶劑對(duì)肉桂進(jìn)行分步逐級(jí)索氏提取，以對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性為導(dǎo)向，提取后各部位的活性大小順序?yàn)椋簾o(wú)水乙醇提取物＞肉桂原粉無(wú)水乙醇提取物＞甲醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞丙酮提取物＞氯仿提取物＞石油醚提取物。高活性的肉桂乙醇索氏提取物經(jīng)用硅膠柱進(jìn)行層析，以HPLC圖譜，薄層層析和體外對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性為依據(jù)，確定在流動(dòng)相為氯仿

3、∶甲醇=20∶80時(shí)從柱中洗脫出來(lái)的第26-28組分對(duì)a-葡萄糖苷酶具有最強(qiáng)的抑制活性，對(duì)此進(jìn)一步進(jìn)行Flash快速色譜純化，結(jié)合酶活實(shí)驗(yàn)用HPLC對(duì)洗脫液進(jìn)行分析，第24和25流份相似且活性最高。 肉桂乙醇提取物鉀鹽在較低的pH環(huán)境下，基本沒(méi)有溶解能力；但隨著溶液pH的上升，其溶解能力也隨之上升，并呈現(xiàn)一定的曲線(xiàn)關(guān)系，在人體可以接受的pH為8時(shí)，肉桂提取物鉀鹽能在水中溶解13mg/ml，制鹽后，其活性雖沒(méi)有原肉桂索氏提取物強(qiáng)，

4、但它具有了水溶性這一期望的性質(zhì)。 通過(guò)超臨界二氧化碳提取和超臨界二氧化碳反溶劑沉析的聯(lián)合工藝制得了肉桂提取物超細(xì)顆粒，通過(guò)單因素水平實(shí)驗(yàn)確定超臨界萃取的萃取的最佳工藝條件為萃取溫度為298K，萃取壓力為20Mpa，萃取時(shí)間2.5h，C02流速為35kg/h。在Hirox三維視頻顯微鏡5600倍下觀察，肉桂提取物超細(xì)顆?；旧隙汲尸F(xiàn)圓球形，少數(shù)為橢球狀，粒子大小均勻，分散性好，粒徑為0.4-1.2μm。粒徑大小分布基本上為正態(tài)分布

5、。不同的實(shí)驗(yàn)條件下，得到的顆粒大小有一定的差異，系統(tǒng)溫度，壓力，提取物乙醇溶液的濃度對(duì)超細(xì)顆粒的粒徑大小有較大的影響，而在本實(shí)驗(yàn)的研究范圍內(nèi)，二氧化碳的流速與乙醇溶液的流速的比率對(duì)肉桂提取物超細(xì)顆粒的粒徑及形態(tài)沒(méi)有明顯的影響。 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明肉桂水提物和肉桂乙醇索氏提取物低中高劑量組都能顯著降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖，在100mg/kg的低劑量組，小鼠的空腹血糖顯著低于陰性對(duì)照組，而且降糖效果也優(yōu)于20mg/kg劑量拜糖萍